"BV-2細胞：小鼠小膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料：源于C５７BL/６小鼠小膠質(zhì)細胞，表達核v-myc、染色體v-raf癌基因，表面表達envgp７０抗原，在形態(tài)學、表型及功能上有吞噬細胞的特征。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：６傳代；２-３天１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：半貼壁生長
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
HUT 28細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關產(chǎn)品：RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
HCA-7細胞系相關產(chǎn)品：VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
SVEC 4-10細胞系相關產(chǎn)品：H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
LLCPK1細胞系相關產(chǎn)品：SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞
SH-SY5Y Parental細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-70細胞、YD38細胞、Calu6細胞
NCI-H1944細胞系相關產(chǎn)品：RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
293H細胞系相關產(chǎn)品：SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
HSC/mHSC細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
H220細胞系相關產(chǎn)品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
CWR22-R1細胞系相關產(chǎn)品：Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
BS-C-1細胞系相關產(chǎn)品：U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
Hs274T細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
H378細胞系相關產(chǎn)品：McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞
OVCAR432細胞系相關產(chǎn)品：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
NRK52E細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
NRK52E細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
HEL-92-1-7細胞系相關產(chǎn)品：HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
SUP-T1細胞系相關產(chǎn)品：N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
UMUC-14細胞系相關產(chǎn)品：HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞
NBLAN5T細胞系相關產(chǎn)品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
Ketr3細胞系相關產(chǎn)品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
NCI-H510A細胞系相關產(chǎn)品：G-292 clone A141B1細胞、H209細胞、CL1.0細胞
Becker細胞系相關產(chǎn)品：WI38細胞、L細胞：細胞、PCI:SG231細胞
SUP-T1細胞系相關產(chǎn)品：N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
MUS-M1細胞系相關產(chǎn)品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
H1573細胞系相關產(chǎn)品：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
GM00637I細胞系相關產(chǎn)品：NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞
BV-2細胞系相關產(chǎn)品：SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞
Huh7.5細胞系相關產(chǎn)品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
H-2228細胞系相關產(chǎn)品：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
NCIH1693細胞系相關產(chǎn)品：C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
BJAB-1細胞系相關產(chǎn)品：SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
BGC-823細胞系相關產(chǎn)品：Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
CCD-1095Sk細胞系相關產(chǎn)品：SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞
5637細胞系相關產(chǎn)品：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
HEL-92-1-7細胞系相關產(chǎn)品：HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
NK92-MI細胞系相關產(chǎn)品：MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關產(chǎn)品：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
Panc02-H0細胞系相關產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
BEL-7405細胞系相關產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
KTC-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
HPDLF細胞系相關產(chǎn)品：HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
BMF細胞系相關產(chǎn)品：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞
OVTOKO細胞系相關產(chǎn)品：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
beta TC6細胞系相關產(chǎn)品：RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
MHCC-LM3細胞系相關產(chǎn)品：C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
Cates-1B細胞系相關產(chǎn)品：BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞
190PT細胞系相關產(chǎn)品：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
Mahlavu細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
HMrSV5細胞系相關產(chǎn)品：CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞
NCIH1650細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
MRMT-1細胞系相關產(chǎn)品：HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
H676B細胞系相關產(chǎn)品：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞
TCMK1細胞系相關產(chǎn)品：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
Bovine ENDometrial cells細胞系相關產(chǎn)品：N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
T 24細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
KP4細胞系相關產(chǎn)品：NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
253J-Bladder-V細胞系相關產(chǎn)品：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
J-774細胞系相關產(chǎn)品：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
FU-97細胞系相關產(chǎn)品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
LWnt-3A細胞系相關產(chǎn)品：A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關產(chǎn)品：UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
WiDr/S細胞系相關產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
BS-C-1細胞系相關產(chǎn)品：U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
GM3570細胞系相關產(chǎn)品：HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
L(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關產(chǎn)品：Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
HEC-1A細胞系相關產(chǎn)品：Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
KMST-6細胞系相關產(chǎn)品：DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
P30-OHKUBO細胞系相關產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、P3HR1細胞
TK-1細胞系相關產(chǎn)品：TM3細胞、SKNBE(1)細胞、PATU-S細胞
HCA7細胞系相關產(chǎn)品：CAKI1細胞、LS123細胞、L-M[TK-]細胞
130 T細胞系相關產(chǎn)品：BT 325細胞、MDA-PCa-2b細胞、GOTO細胞
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