1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng) BV2
細(xì)胞別稱(chēng) BV-2
細(xì)胞背景描述 BV-2細(xì)胞是由E·Blasi建立于1990年;BV-2細(xì)胞由小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染v-raf/v-myc獲永生化。BV-2細(xì)胞保留有小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞多種形態(tài)、表征和功能特征;免疫組化結(jié)果顯示,BV2細(xì)胞為MAC1、MAC2陽(yáng)性;而MAC3、膠質(zhì)細(xì)胞原纖維酸性蛋白、半乳糖腦苷脂為陰性。
組織來(lái)源 腦;膠質(zhì)瘤
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類(lèi)型 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生長(zhǎng)特性 半貼半懸
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEM(含NEAA)(PM150410)+10% FBS(164210-50)+1%
P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞,懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞,可用離心管收集細(xì)胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細(xì)胞;
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸?。?/p>
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤(rùn)洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化,輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞;
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
消化時(shí)間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
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