"IPEC-J2 Adherent豬小腸上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:小腸;上皮細(xì)胞;自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
IPEC-J2 Adherent豬小腸上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來(lái)自胎兒傳代50次后衰老死亡,來(lái)自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來(lái)自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來(lái)自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無(wú)定論,出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō),其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程,無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō),都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。
SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞
COLO 678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-432細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
NCIH1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
IPEC-J2 Adherent豬小腸上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說(shuō)明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
PTK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97L細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞
MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
KE 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞
Panc-1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞
A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞
SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
SK-NM-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVSMC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞
IPEC-J2 Adherent豬小腸上皮細(xì)胞系
DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞
CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞
Ca-Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞
Ca-Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞
HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細(xì)胞、Saos2細(xì)胞、GT39細(xì)胞
IM9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞
H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞
WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞
PGLH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-11細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞
LN-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞
HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、T_T_細(xì)胞
HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞
GM 637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL 1細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞、HCT15細(xì)胞
HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞
NCI-H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS1728細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞
MCF7-CTRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
MDAPCa2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3細(xì)胞、JM1細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞
UCLA-SO-M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細(xì)胞、STO細(xì)胞、MV-3細(xì)胞
ACC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH226細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
CNE2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH-91細(xì)胞、COS-1細(xì)胞、CNE細(xì)胞
CHOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞
ATC241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080.T細(xì)胞、CA922細(xì)胞、MDBK細(xì)胞
RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞
5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞
BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞
NCI-H78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞
IPEC-J2 Adherent豬小腸上皮細(xì)胞系
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH747細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞、NCI747細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞
UMNSAH/DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM-460細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞、H-1993細(xì)胞
SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞
NSC-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMK細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞
SK-Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞
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