"IPEC-J2細胞：豬小腸上皮細胞系
細胞背景資料：小腸；上皮細胞；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
NCIH1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
C42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞
A-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
LL/2(LLc1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細胞、MDA-MB-361細胞、SW 1463細胞
KU.812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細胞、Hi-five細胞、HEK-293-H細胞
H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞
OVCAR 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
SK-N-MC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
MDA453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
HECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞
MN 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞
A20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
A20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
COLO-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
HCEC-B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞
BNL-CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
RAW 264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
HuLEC-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
WC00059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
M-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
GM03671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
BT.549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
TSCCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞
Karpas-422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞
H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞
BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
CCD-841-CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
BC-009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
Okayama University Medical School-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞
UWB1-289細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
LL/2(LLc1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細胞、MDA-MB-361細胞、SW 1463細胞
CBRH-7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
D10G41細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102細胞、AR4IP細胞、bEnd3細胞
OCI-AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
LNCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
H-2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
CHG-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
CAMA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-7702細胞、Hs 695.T細胞、RKO-AS45-1細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細胞、Uhth-74細胞、J774A1細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、RFL 6細胞、MDAMB175VII細胞
TE 85.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、H711細胞
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