"LAD 2 Adherent人肥大細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：肥大細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很?chē)?yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì))，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過(guò)度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
LAD 2 Adherent人肥大細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無(wú)菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌，不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾，勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無(wú)菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒(méi)有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
Rat podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239-A細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
H-2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細(xì)胞、HCC827細(xì)胞、H-128細(xì)胞
GBCSD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮
LAD 2 Adherent人肥大細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
KTA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu-19細(xì)胞、M07e細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞
BIC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1048細(xì)胞、TR 146細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
MAVER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞
BCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M4e細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞
SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞
B95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3-H-I細(xì)胞、HT29細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
NCI-H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞
hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx-147細(xì)胞、H510A細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞
MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞
Tu-177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUG-Chor1細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞、WM2664細(xì)胞
LAD 2 Adherent人肥大細(xì)胞系
NCIH1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞
ASPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞、MFM223細(xì)胞
NU-GC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-1細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
MHCC-LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞
SKO007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L1210細(xì)胞、BL-6細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞
P3-x63-Ag8 653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞、MV3細(xì)胞
SW620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta 519細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞
NCI-H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
EoL-1-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞
SNU-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細(xì)胞、P36細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞
SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞
293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞
M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
CT26-clone 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞、SF 539細(xì)胞
CORL279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2BBe細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞、H157細(xì)胞
Caco-2/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細(xì)胞、R D細(xì)胞、SUD4細(xì)胞
143TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)C細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞
NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
OE33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
T-47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149 PT細(xì)胞、HT115細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
SBC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞
BC-020細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-8161細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞、B-16細(xì)胞
OAW 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞
SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞
H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞
CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞
CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
HSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-596細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞
Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞
LAD 2 Adherent人肥大細(xì)胞系
KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞
SU86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞
NIH:OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、SR細(xì)胞
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞
Hs832T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA I細(xì)胞、SCL I細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞
CTLL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞、MC9細(xì)胞
Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞
SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、OCM1細(xì)胞
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
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