"RAG Adherent小鼠腎腺癌細胞系
細胞背景資料：腎癌；BALB/c
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RAG Adherent小鼠腎腺癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
P3.653細胞系相關產品：Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞
NPC-TW-039細胞系相關產品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
AMO1細胞系相關產品：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
Earles's cells細胞系相關產品：BC3 H1細胞、OCI-LY-8細胞、NCI-SNU-C2B細胞
RT-BM-1細胞系相關產品：HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞
BV-2細胞系相關產品：SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞
細胞生長特性：貼壁
RAG Adherent小鼠腎腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
NCI-SNU-886細胞系相關產品：SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞
NCIH2171細胞系相關產品：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
RCF細胞系相關產品：HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
Pt-K2細胞系相關產品：MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞
Hs294細胞系相關產品：HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞
HLEC細胞系相關產品：50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
NCI-H1299細胞系相關產品：COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
HEL299細胞系相關產品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
SK-BR3細胞系相關產品：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
NCI-H1355細胞系相關產品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
HPDLF細胞系相關產品：HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關產品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
hESC細胞系相關產品：BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞
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NCIH740細胞系相關產品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
NCI-H196細胞系相關產品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
HCC0044細胞系相關產品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
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KMS26細胞系相關產品：Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
CL1.0細胞系相關產品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
SW1116細胞系相關產品：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
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MES13細胞系相關產品：FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
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BT 20細胞系相關產品：NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
U2932細胞系相關產品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
HO8910細胞系相關產品：HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞
HCA 7細胞系相關產品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
KM12SM細胞系相關產品：OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
293T細胞系相關產品：CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
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NTERA-2 cl.D1細胞系相關產品：GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞
KU-812-F細胞系相關產品：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
BT20細胞系相關產品：OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞
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Hs274T細胞系相關產品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
HM細胞系相關產品：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
AN3CA細胞系相關產品：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
38C13細胞系相關產品：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
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Mouse INsulinoma 6細胞系相關產品：U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
OVCA-432細胞系相關產品：MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞
NuTu-19細胞系相關產品：SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
RS4:11細胞系相關產品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
TGHAVSMC細胞系相關產品：HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞
Hs840T細胞系相關產品：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
FHs74 Int細胞系相關產品：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
WRL-68細胞系相關產品：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
HEK 293FT細胞系相關產品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
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Walker-Ca.256細胞系相關產品：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
H2052_MM細胞系相關產品：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關產品：NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
SF 126細胞系相關產品：B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞
MV 3細胞系相關產品：MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關產品：SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
SACC83細胞系相關產品：BMSCs（mBMSCs）細胞、MLMA細胞、SF17細胞
U20-S細胞系相關產品：MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞
MOLT 4細胞系相關產品：NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞
RD 2細胞系相關產品：SACCLM細胞、KM-H2細胞、H847細胞
MHCC97L細胞系相關產品：MESSADX5細胞、SW-1990細胞、HS-5細胞
RCF細胞系相關產品：HA細胞、MDAMB468細胞、HIT-T15細胞
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