"F9 Adherent小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
F9 Adherent小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
CEM/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2106細(xì)胞、DH-82細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞
MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma-261細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞、HANK1細(xì)胞
HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-5細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞
HSAS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEM15A細(xì)胞、NSH細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞
MGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 115細(xì)胞、Hs675細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
F9 Adherent小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞
NCI-H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞
NCI-H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞
Colo16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBMEC細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞
MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞
TE-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leydig細(xì)胞、KU1919細(xì)胞、T.T細(xì)胞
HS852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-299細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞
NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞
JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞
MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞
KNS-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388D1細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞、T47-D細(xì)胞
F9 Adherent小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
GP-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo7e細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞、LCMS細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
Swiss 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 19細(xì)胞、624細(xì)胞、HNE2細(xì)胞
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞
Rat Lung-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-07e細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞
BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞
ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞
JCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞、H-64細(xì)胞
HL60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Farage細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
PANC1005細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2198細(xì)胞、N-87細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞
SU-DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT78細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞
MFD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞
H-2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、WM115F細(xì)胞
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞
U14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IFRS1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞、H-1838細(xì)胞
McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
HRA19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞
BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS-2B細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞
GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞
KMH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly1細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
GS9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞、RGE細(xì)胞
SKRC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1155細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
EA hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞
SK Mel28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:USMC細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞
SK HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-H細(xì)胞、HTR8細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
EC-GI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞
EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞
KP-N-RT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1563細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞、HG2855細(xì)胞
RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
F9 Adherent小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
DHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 BL6細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞、PL-12細(xì)胞
PLC-PRF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞
SEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞
HMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780CP細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞、KU.812細(xì)胞
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞
NBL_S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞
OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細(xì)胞、MCA38細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞
MS751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞
NTera2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu8988s細(xì)胞、L02細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞
CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7404細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、GES1細(xì)胞
NCI-H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞
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