"WB-F344 Adherent大鼠肝上皮樣干細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
WB-F344 Adherent大鼠肝上皮樣干細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
Nb2a細胞系相關產(chǎn)品：CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
WIL2-S細胞系相關產(chǎn)品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
Mac-1細胞系相關產(chǎn)品：U87細胞、SNU761細胞、3396細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CTLL(2)細胞系相關產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
NCI-H1184細胞系相關產(chǎn)品：H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
TCam 2細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞
細胞生長特性：貼壁生長
WB-F344 Adherent大鼠肝上皮樣干細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或對數(shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
LPC-H12細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞
SW626細胞系相關產(chǎn)品：XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
SK.MEL.28細胞系相關產(chǎn)品：H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞
OV-CA 432細胞系相關產(chǎn)品：KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞
SKRC-20細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
Human Embryo Lung-1細胞系相關產(chǎn)品：H-1437細胞、SKNBE(1)細胞、TKB-1細胞
NCI-H1618細胞系相關產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
UCW 100細胞系相關產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
TPC-1細胞系相關產(chǎn)品：OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
H-865細胞系相關產(chǎn)品：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
P388細胞系相關產(chǎn)品：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
A375mel細胞系相關產(chǎn)品：SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
OVCA433_Bast細胞系相關產(chǎn)品：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
WB-F344 Adherent大鼠肝上皮樣干細胞系
MS-751細胞系相關產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
SK HEP 01細胞系相關產(chǎn)品：HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
SR-786細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞
SR-786細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞
OVCAR.4細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
HS 445T細胞系相關產(chǎn)品：MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
D324細胞系相關產(chǎn)品：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
U-2 OS細胞系相關產(chǎn)品：CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
PAN 02細胞系相關產(chǎn)品：MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
OVSAHO細胞系相關產(chǎn)品：WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞
NCIH650細胞系相關產(chǎn)品：K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
LM1細胞系相關產(chǎn)品：MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
DLM8細胞系相關產(chǎn)品：TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞
High5細胞系相關產(chǎn)品：C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞
CEM-C1細胞系相關產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
KPL4細胞系相關產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
PC10細胞系相關產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
PLA 802細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
K299細胞系相關產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
CAL 85-1細胞系相關產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
MDA-415細胞系相關產(chǎn)品：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞
FDCP1細胞系相關產(chǎn)品：RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞
NEC8細胞系相關產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
H-2107細胞系相關產(chǎn)品：rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞
SKHEP-1細胞系相關產(chǎn)品：SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
VMCUB1細胞系相關產(chǎn)品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
VERO C 1008細胞系相關產(chǎn)品：IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
SW 1990細胞系相關產(chǎn)品：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
Mono Mac 1細胞系相關產(chǎn)品：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞
SK-N-MC細胞系相關產(chǎn)品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
NCIH520細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
HCC-1438細胞系相關產(chǎn)品：LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
RPMI7951細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
LC1sq細胞系相關產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
HCE-T細胞系相關產(chǎn)品：Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞
HSKMC細胞系相關產(chǎn)品：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
K299細胞系相關產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
H510細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
VK-2/E6E7細胞系相關產(chǎn)品：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞
BJA-B細胞系相關產(chǎn)品：Y3Ag1.2.3細胞、NE-1細胞、BC-020細胞
WB-F344 Adherent大鼠肝上皮樣干細胞系
H1963細胞系相關產(chǎn)品：SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
CL-34細胞系相關產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
hCMEC/D3細胞系相關產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
HEL-92-1-7細胞系相關產(chǎn)品：HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
H1882細胞系相關產(chǎn)品：HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞
KYSE270細胞系相關產(chǎn)品：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
SW1783細胞系相關產(chǎn)品：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞
OVCA 432細胞系相關產(chǎn)品：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
NMCG-1細胞系相關產(chǎn)品：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞
QGP-1細胞系相關產(chǎn)品：BALB 3T3 clone A31細胞、GM00346細胞、ASH-3細胞
NCI.H522細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細胞、TE32細胞、KYSE 140細胞
SK.MEL.28細胞系相關產(chǎn)品：H-1770細胞、AU-565細胞、U87MG細胞
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