"WB-F344 Cell:大鼠肝上皮樣干細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
HIT-T15細胞系相關產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
H-1573細胞系相關產(chǎn)品:HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
SNK6細胞系相關產(chǎn)品:BJA-B1細胞、H69C細胞、CCC-HPF-1細胞
U-138-MG細胞系相關產(chǎn)品:SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
WB-F344 Cell:大鼠肝上皮樣干細胞系
細胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低,保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了,如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HTh74細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞
NB1-RGB細胞系相關產(chǎn)品:D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞
HMC-1細胞系相關產(chǎn)品:ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
MAVER1細胞系相關產(chǎn)品:SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
MKN7細胞系相關產(chǎn)品:Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
細胞生長特性:貼壁生長
WB-F344 Cell:大鼠肝上皮樣干細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:上皮樣
PGBE1細胞系相關產(chǎn)品:Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
IPAM-WT細胞系相關產(chǎn)品:Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
TE 354.T細胞系相關產(chǎn)品:NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞
AG06814-J細胞系相關產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
HT-29細胞系相關產(chǎn)品:HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
HS-294細胞系相關產(chǎn)品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
WB-F344 Cell:大鼠肝上皮樣干細胞系
786-0細胞系相關產(chǎn)品:NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
Namalva細胞系相關產(chǎn)品:Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
H748細胞系相關產(chǎn)品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞
EB-2細胞系相關產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
MIHA細胞系相關產(chǎn)品:HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞
HDQP1細胞系相關產(chǎn)品:Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞
AtT20細胞系相關產(chǎn)品:U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
NCI-SNU-182細胞系相關產(chǎn)品:HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
NCI-H1882細胞系相關產(chǎn)品:HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞
NCI-H1882細胞系相關產(chǎn)品:HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞
Functional Liver Cell-7細胞系相關產(chǎn)品:OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
SNU739細胞系相關產(chǎn)品:CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞
FRhK4細胞系相關產(chǎn)品:NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞
H1915細胞系相關產(chǎn)品:MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞
RGC-6細胞系相關產(chǎn)品:RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
AML193細胞系相關產(chǎn)品:NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞
HFLS細胞系相關產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
NCIH2081細胞系相關產(chǎn)品:74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
HCC95細胞系相關產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
H-774細胞系相關產(chǎn)品:GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
BEL 7405細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
JB 6細胞系相關產(chǎn)品:H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
T-24細胞系相關產(chǎn)品:SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
DMS-153細胞系相關產(chǎn)品:H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
HSC-I細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
VMRCRCZ細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
OCI AML5細胞系相關產(chǎn)品:H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
NKL細胞系相關產(chǎn)品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
UWB1289細胞系相關產(chǎn)品:A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞
JROECL 33細胞系相關產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
KM933細胞系相關產(chǎn)品:Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
MHCCLM3細胞系相關產(chǎn)品:HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞
BrCL18細胞系相關產(chǎn)品:MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
NCIH146細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
VM-CUB1細胞系相關產(chǎn)品:HSC4細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞、SW-948細胞
alphaTC clone 6細胞系相關產(chǎn)品:L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
CA922細胞系相關產(chǎn)品:MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
T_T_細胞系相關產(chǎn)品:BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
NCTC 1469細胞系相關產(chǎn)品:WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞
MDA-175細胞系相關產(chǎn)品:Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞
CAMA1細胞系相關產(chǎn)品:HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
PLA 802細胞系相關產(chǎn)品:MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞
WB-F344 Cell:大鼠肝上皮樣干細胞系
HCT 15細胞系相關產(chǎn)品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
Hs675T細胞系相關產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
H510A細胞系相關產(chǎn)品:DHL-5細胞、PLB 985細胞、COLO-741細胞
OCI-Ly 19細胞系相關產(chǎn)品:SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
266 Bl細胞系相關產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關產(chǎn)品:MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
Hi-5細胞系相關產(chǎn)品:HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
EFO 27細胞系相關產(chǎn)品:TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
MDA-MB-134VI細胞系相關產(chǎn)品:OCI-AML3細胞、LM-TK-細胞、NCI-H2087細胞
MGc80-3細胞系相關產(chǎn)品:Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞
HPDEC細胞系相關產(chǎn)品:COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞
H1963細胞系相關產(chǎn)品:SK Col 1細胞、VMM-5A細胞、OCI/AML2細胞
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關鍵字: WB-F344 Cell:大鼠肝上皮樣干細胞系
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