"BRL Adherent大鼠肝細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說,針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4)胰酶消化時(shí)間過長或過短:時(shí)間過長,細(xì)胞死亡;時(shí)間過短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗(yàn)證;4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BRL Adherent大鼠肝細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我??吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法,這個(gè)挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細(xì)胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實(shí)是很好消化的細(xì)胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞
RPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA-FLSs細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞、H2286細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞
EAhy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86_86細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、huH 1細(xì)胞
MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
BRL Adherent大鼠肝細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題,究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M(jìn)行解決?以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題,總結(jié)的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過程中細(xì)胞裂解,推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升;2)解凍過程中的問題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng);3)對冷凍液過敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期;4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長,存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。
ACCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Skin 1細(xì)胞、143B細(xì)胞、SW626細(xì)胞
NCIH1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG-5細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、JIII細(xì)胞
H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H522細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
H-920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM3細(xì)胞、SNU475細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞
NCI-H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-B3細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、CORL279細(xì)胞
OCI/AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞
MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞
PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞
NCI-H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細(xì)胞、H676細(xì)胞、VSMC細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
EBNA-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(1)細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞、GP5d細(xì)胞
CMT.64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv.1.Lu細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞
BRL Adherent大鼠肝細(xì)胞系
SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
NCI-H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
N-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HaCaT細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、Hs445細(xì)胞
BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞
MC-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1428細(xì)胞、C3A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞
MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
TOV21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞
MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞
NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞
HCT-GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 126細(xì)胞、H460細(xì)胞、NALM6細(xì)胞
TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
IR983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
UCH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞
KE39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT8810細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞
SUD-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞
LTEP-a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S37細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、WRL68細(xì)胞
BRL Adherent大鼠肝細(xì)胞系
KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞
CV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVISE細(xì)胞、HSC細(xì)胞、H-2110細(xì)胞
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞
Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞
HCASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞
UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞
Panc-03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞
B16BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細(xì)胞、RN細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H250細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞、PC-9細(xì)胞
H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo 59J細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、293-F細(xì)胞
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