"COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 Hep2細胞系相關產(chǎn)品:H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞 GM04680細胞系相關產(chǎn)品:PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞 Colo205細胞系相關產(chǎn)品:KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞 細胞生長:貼壁 COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內,依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2傳代 ketr 3細胞系相關產(chǎn)品:HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞 A2780CP70細胞系相關產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞 SUM-52PE細胞系相關產(chǎn)品:GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞 3-LL細胞系相關產(chǎn)品:CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞 SU.86細胞系相關產(chǎn)品:TCam-2細胞、IGROV1細胞、HPAF-I細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 BAR-T細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞 Bac 1.2F5細胞系相關產(chǎn)品:130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞 Strain L-929細胞系相關產(chǎn)品:LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞 LAD 2細胞系相關產(chǎn)品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞 NCIH2170細胞系相關產(chǎn)品:Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞 HuH 6細胞系相關產(chǎn)品:UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞 A375S2細胞系相關產(chǎn)品:H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞 CEM/0細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞 3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞 HCC1500細胞系相關產(chǎn)品:OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞 COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細胞系 SCC4細胞系相關產(chǎn)品:COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞 NW-MEL-38細胞系相關產(chǎn)品:LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞 P-815細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞 BNL.CL2細胞系相關產(chǎn)品:TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞 SK ES 01細胞系相關產(chǎn)品:MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞 Neuro 2a細胞系相關產(chǎn)品:A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞 Neuro 2a細胞系相關產(chǎn)品:A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞 HCC-70細胞系相關產(chǎn)品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞 GM04679細胞系相關產(chǎn)品:HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞 MDA-MB-157細胞系相關產(chǎn)品:A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞 MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞 A-2058細胞系相關產(chǎn)品:U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞 CWR22-Rv1細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞 MSC細胞系相關產(chǎn)品:CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞 GH3細胞系相關產(chǎn)品:UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞 PTK 1細胞系相關產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞 Nb2細胞系相關產(chǎn)品:C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞 GP-293細胞系相關產(chǎn)品:Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞 AMC-HN-8細胞系相關產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞 COR-L88細胞系相關產(chǎn)品:FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞 HCC1569細胞系相關產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞 H-1666細胞系相關產(chǎn)品:OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞 B16-F0細胞系相關產(chǎn)品:Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞 SW579細胞系相關產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞 TM3細胞系相關產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞 beta-TC6細胞系相關產(chǎn)品:BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞 CRFK細胞系相關產(chǎn)品:TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞 526細胞系相關產(chǎn)品:SK-RC-52細胞、LUDLU-1細胞、H548細胞 NTC-200細胞系相關產(chǎn)品:Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞 Med 341細胞系相關產(chǎn)品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞 CWR22R細胞系相關產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞 H2085細胞系相關產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞 WIL2 S細胞系相關產(chǎn)品:OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞 CCD-1112sk細胞系相關產(chǎn)品:Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞 U266BL細胞系相關產(chǎn)品:HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞 H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞 TE-5細胞系相關產(chǎn)品:Leydig細胞、KU1919細胞、T.T細胞 H-125細胞系相關產(chǎn)品:U937細胞、MV4II細胞、P388細胞 MOLM16細胞系相關產(chǎn)品:16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞 KE 37細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞 SACCLM細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞 NCI-HUT-596細胞系相關產(chǎn)品:675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞 MDA2B細胞系相關產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞 MV4:11細胞系相關產(chǎn)品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞 Panc-08.13細胞系相關產(chǎn)品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞 SKMEL28細胞系相關產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞 U-CH1細胞系相關產(chǎn)品:CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞 HSC-I細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞 Jiyoye細胞系相關產(chǎn)品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞 Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產(chǎn)品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞 Detroit-562細胞系相關產(chǎn)品:T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞 COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細胞系 A-431細胞系相關產(chǎn)品:RL95-2細胞、Raji細胞、SKBR-3細胞 CaSki細胞系相關產(chǎn)品:HSF2細胞、WILL-2細胞、H-650細胞 U-87 MG細胞系相關產(chǎn)品:LAC細胞、RMS 1598細胞、SU-DHL-2細胞 Strain L-929細胞系相關產(chǎn)品:LED-WiDr細胞、SCL1細胞、TR 146細胞 "
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