"COV434 Cells|人卵巢顆粒腫瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HCT116/L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞
H-4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
MDAMB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
細胞生長:貼壁
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
COV434 Cells|人卵巢顆粒腫瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
SK-MEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
T-47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
以下對初次培養(yǎng)細胞人員來說,是非常好的開門教程:準備室的設(shè)備:單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺;配液室的設(shè)備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液);培養(yǎng)室的設(shè)備:液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄);必須放在無菌間的設(shè)備:離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌:定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外燈照射;實驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘;實驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺;實驗人員的無菌準備:肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦凈雙手。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
COV434 Cells|人卵巢顆粒腫瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
RDES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
Mo7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
Ketr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
NCIH1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
COV434 Cells|人卵巢顆粒腫瘤細胞系
NCI-H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
LAD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
NCI-H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞
N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
DMS-114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
HS578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
FLC-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞
95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
NCI-H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
SNUC2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
NCI-H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL28細胞、L1210細胞、SCC-4細胞
BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞
S3-HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞
NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
JURKAT E-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
SW 403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
NCIN87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
P3X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞
HeLa 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
SUM-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
SW 900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
Colon26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABE8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
Hs821T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞
M-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
MIMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞
Hs 888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞
SCI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
Hs 706.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC4細胞、HCC1438細胞、HCC-1599細胞
MA-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞
CW2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞
IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
COLO-320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
COV434 Cells|人卵巢顆粒腫瘤細胞系
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細胞、RD-ES細胞、LM2-4175細胞
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、H774細胞、WI38細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細胞、NCIH146細胞、KU-812F細胞
AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA Dx5細胞、CA-OV-3細胞、R 2 C細胞
"