"COV362 epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞 G519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H747細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞 H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細(xì)胞、MBVP細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 COV362 epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 MV4II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞 SUP T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細(xì)胞、MT-2細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞 NB19-RIKEN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MODE-K細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞 CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞 Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 COV362 epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 ESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-79細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞 LS 513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H292細(xì)胞、Molm14細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞 HuH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H747細(xì)胞、Wien133細(xì)胞、AKR細(xì)胞 NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞 Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞、SW1463細(xì)胞 SUDHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞 NBL_S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞 PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-69細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞 Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞 Colo-678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15WT細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞 COV362 epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系 U031細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL299細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞 MOLP8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細(xì)胞、LX-2細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞 PCI-04B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 39細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞 L2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D562細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞 L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞 Panc2_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細(xì)胞、D 407細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞 Panc2_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細(xì)胞、D 407細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞 MA-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69/P細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞 D324細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR32細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞 5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞 UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞 KYSE 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞 CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞 OP9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU354細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞 alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞 HL 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細(xì)胞、B-104細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞 NBLAN5T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞 CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞 OV 2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOXNY細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞 Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞 OPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-YN細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞 SHP-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞 A-2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2-OS細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、PK15細(xì)胞 HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞 HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞 CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞 OV1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-30細(xì)胞、Colon38細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞 NALM-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCCJF細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞 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