"NB1RGB Cell:人皮膚成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:皮膚;成纖維細(xì)胞;男性
hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
PA-TU-8988S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2286細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞
P3/X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NB1RGB Cell:人皮膚成纖維細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤](méi)有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開(kāi)細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開(kāi),受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來(lái),又不能太過(guò),一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開(kāi)。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問(wèn)題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無(wú)血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來(lái)洗,洗的效果和用無(wú)血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開(kāi)來(lái)。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開(kāi)來(lái)的時(shí)候,就可以直接吹打下來(lái),但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過(guò)了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒(méi)有胰酶了,可以選用此方法。不過(guò)一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞
HuH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C7細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞
KM12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage Original Line細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞、SW-839細(xì)胞
HCO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU368細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞
Panc5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs281T細(xì)胞、H2342細(xì)胞、TOV21細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
NB1RGB Cell:人皮膚成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題,還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過(guò)7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問(wèn)題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見(jiàn)得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
Hs27F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt3A細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2V6.11細(xì)胞、P-19細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞
HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA-1細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞、OSA細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞
JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞
NB1RGB Cell:人皮膚成纖維細(xì)胞系
Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞
SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞
Hs.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
DC2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2-DAP細(xì)胞、PK136細(xì)胞、HNSC細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
SK-N-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274.T細(xì)胞、IM-95細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
HuPT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞
HuPT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞
BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞、50.B1細(xì)胞
B16-F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs737T細(xì)胞、AK細(xì)胞、HOEC細(xì)胞
D341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞
SK-Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細(xì)胞、YAC細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞
WEHI 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-8113細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞
RIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AKR細(xì)胞、H-2081細(xì)胞、H8細(xì)胞
HRC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW-2細(xì)胞、HA1800細(xì)胞、MO59J細(xì)胞
F98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-CAR細(xì)胞、YES 2細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞
AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
P-388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞
PLC8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞
A2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsACL細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞
TSCC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-756細(xì)胞、M4e細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞
1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞
H9c2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU_145細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞
MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
hMSC-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YT細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞
L-540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO 81-2細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
RT4-D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞
OV1/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA46細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞、CCD18細(xì)胞
hCMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-83細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、MN9D細(xì)胞
BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞
SW-403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細(xì)胞、HSC5細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞
M07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BS-C-1細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞
Clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1Lu細(xì)胞、HET1A細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
HEK-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞
NB1RGB Cell:人皮膚成纖維細(xì)胞系
YES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H889細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞
766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EnCa1細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞
H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞
NCI-H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞、LP1細(xì)胞
Panc 03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞
HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2_03細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞
HCCC9810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞
Huh 7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa2細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞
SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、FC33細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞
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上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊(duì),提供超過(guò)100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢(shì)市場(chǎng)資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國(guó)內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。