"RAT2 Cell:大鼠成纖維細胞系
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：成纖維細胞；自發(fā)永生；Fischer ３４４
WSU-HN13細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞
SuDHL 10細胞系相關產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
TE 85.T細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
CCRF細胞系相關產(chǎn)品：EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RAT2 Cell:大鼠成纖維細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結：懸浮性細胞應如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
WM 2664細胞系相關產(chǎn)品：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關產(chǎn)品：U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
H-838細胞系相關產(chǎn)品：CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關產(chǎn)品：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
細胞生長特性：貼壁
RAT2 Cell:大鼠成纖維細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
L-Wnt3A細胞系相關產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
HS578細胞系相關產(chǎn)品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
Raji細胞系相關產(chǎn)品：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
KYSE410細胞系相關產(chǎn)品：PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
CHO/dhFr-細胞系相關產(chǎn)品：MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞
HMVEC細胞系相關產(chǎn)品：NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞
LA-N-1細胞系相關產(chǎn)品：HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
RAT2 Cell:大鼠成纖維細胞系
RCC-4細胞系相關產(chǎn)品：A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞
KYSE270細胞系相關產(chǎn)品：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
TE-3A細胞系相關產(chǎn)品：COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
HCT-FET細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
GTL 16細胞系相關產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關產(chǎn)品：Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
GH3細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
CV-1細胞系相關產(chǎn)品：CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
Panc 02細胞系相關產(chǎn)品：T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
Panc 02細胞系相關產(chǎn)品：T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
CAL-33細胞系相關產(chǎn)品：COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞
HBEpiC細胞系相關產(chǎn)品：RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
Fao細胞系相關產(chǎn)品：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
NCIH358細胞系相關產(chǎn)品：NOMO-1細胞、Giant Cell Tumor細胞、COS-1細胞
32D.cl3細胞系相關產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞
NHA細胞系相關產(chǎn)品：MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
HL-60細胞系相關產(chǎn)品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
U-373MG ATCC細胞系相關產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞
BJA-B1細胞系相關產(chǎn)品：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關產(chǎn)品：SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
SCL-II細胞系相關產(chǎn)品：C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
B95-8細胞系相關產(chǎn)品：TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞
Cates-1B細胞系相關產(chǎn)品：BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞
NCI-H2052細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞
Tu-212細胞系相關產(chǎn)品：SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
SU86.86細胞系相關產(chǎn)品：NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
HEK.EBNA細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
CAL851細胞系相關產(chǎn)品：CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
Hs 729細胞系相關產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
HS-695T細胞系相關產(chǎn)品：HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞
MCF10A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞
SCL-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關產(chǎn)品：SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
TE 85.T細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
P3JHR1細胞系相關產(chǎn)品：CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
H69C細胞系相關產(chǎn)品：H522細胞、MEF (CF-1)細胞、Jurkat E6-1細胞
HB611細胞系相關產(chǎn)品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
Clone 166細胞系相關產(chǎn)品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
Clone 166細胞系相關產(chǎn)品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
HLEB3細胞系相關產(chǎn)品：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
COLO-829細胞系相關產(chǎn)品：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
RAT2 Cell:大鼠成纖維細胞系
FF-WT-BJ細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞
HO-8910PM細胞系相關產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
JIMT1細胞系相關產(chǎn)品：SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
SW 1990細胞系相關產(chǎn)品：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
P31 FUJ細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞
NP69SV40T細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
L-Wnt3A細胞系相關產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
mRTEC細胞系相關產(chǎn)品：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
KPNRTBM1細胞系相關產(chǎn)品：32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞
Bx-PC3細胞系相關產(chǎn)品：Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞
JM1細胞系相關產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、KYSE140細胞、H-1993細胞
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關鍵字： RAT2 Cell:大鼠成纖維細胞系
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