"NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細胞系
細胞背景資料：皮膚；成纖維細胞；男性
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
H1975細胞系相關產品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
TFH細胞系相關產品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
NCI-H378細胞系相關產品：WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞
細胞生長：貼壁
NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PA I細胞系相關產品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
QGY 7701細胞系相關產品：NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
PC12(高分化)細胞系相關產品：Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞
H-1385細胞系相關產品：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
WEHI231細胞系相關產品：LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
MDA MB 134VI細胞系相關產品：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
Panc 08.13細胞系相關產品：AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞
MG63細胞系相關產品：SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞
H9c2 (2-1)細胞系相關產品：HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞
SK-MEL-5細胞系相關產品：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
ST-2細胞系相關產品：SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關產品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
RK 13細胞系相關產品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
MC57G細胞系相關產品：HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
KFB細胞系相關產品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細胞系
LLC細胞系相關產品：SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
293A細胞系相關產品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
HO-8910 PM細胞系相關產品：CL-40細胞、H-2227細胞、NCI-H345細胞
NCIH1869細胞系相關產品：H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
Hep G2/C3A細胞系相關產品：HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞
DAKIKI Clone 1細胞系相關產品：A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
DAKIKI Clone 1細胞系相關產品：A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
HAVSMC細胞系相關產品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
MOLT 3細胞系相關產品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關產品：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
A72細胞系相關產品：JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
87MG細胞系相關產品：BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
RPMI8226細胞系相關產品：TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞
IBRS-2細胞系相關產品：Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞
Ramos.2G6.4C10細胞系相關產品：Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞
BIU-87細胞系相關產品：HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞
KTC-1細胞系相關產品：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
IR 983F細胞系相關產品：MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞
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MC/CAR細胞系相關產品：A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
TGW細胞系相關產品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
451-LU細胞系相關產品：U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
As-PC1細胞系相關產品：MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
NB9細胞系相關產品：WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞
32D clone3細胞系相關產品：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞
HEK-293-FT細胞系相關產品：NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞
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MEL細胞系相關產品：RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
HRCEC細胞系相關產品：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
WISH細胞系相關產品：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
H774細胞系相關產品：IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞
RT 112細胞系相關產品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
Ball 1細胞系相關產品：KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
Bovine Turbinate細胞系相關產品：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
NCIH1869細胞系相關產品：H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
NCTC clone 929細胞系相關產品：MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
McArdle RH-7777細胞系相關產品：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
MDAMB231細胞系相關產品：MUTZ-1細胞、PANC-08-13細胞、H128細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關產品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關產品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
RT 112細胞系相關產品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
NCI-H441-4細胞系相關產品：H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
RPPVEC細胞系相關產品：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞
NMC-G1細胞系相關產品：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關產品：Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
NCI-SNU-423細胞系相關產品：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
MOLT3細胞系相關產品：NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
LWnt3A細胞系相關產品：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
NCI-H1838細胞系相關產品：A3細胞、Strain V細胞、B16細胞
CF-PAC1細胞系相關產品：NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細胞系
TE-13細胞系相關產品：Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞
HRGEC細胞系相關產品：OCI-LY-18細胞、MDA-231細胞、TCam-2細胞
HOS-MNNG細胞系相關產品：GB1細胞、SK Mel28細胞、NCIH1734細胞
MG63細胞系相關產品：SW 1271細胞、C4-2 B細胞、WEHI-231細胞
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