pET-N-His-TEV
pET-N-His-TEV是一種用于表達N端含有His標簽(His tag)的原核表達質(zhì)粒。本質(zhì)粒N端His標簽后含有TEV酶切位點,可通過TEV Protease (P2307/P2308)切除N端的His標簽。本質(zhì)粒為卡那霉素抗性。 本質(zhì)粒含有T7啟動子/lac操縱子,可以在異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的誘導下高效啟動目的蛋白表達。在多克隆位點的前面,帶有一個His標簽的編碼序列,含有6個組氨酸(6X His)。因此在多克隆位點根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達N端含有His標簽的目的蛋白。 本載體在N端His標簽與多克隆位點之間含有TEV蛋白酶(TEV Protease)識別的七肽序列ENLYFQG,對應的核酸序列為GAGAACCTGTACTTCCAAGGG,因此可在目的蛋白純化后用TEV蛋白酶切除N端His標簽。TEV蛋白酶酶切發(fā)生在七肽序列的Q和G之間,因此在酶切去除His標簽的時候目的蛋白的N端會留下一個額外的氨基酸殘基G。 通??梢圆捎萌鏐eyoGold™ His-tag Purification Resin (P2210/P2218/P2220)或His標簽蛋白純化試劑盒(P2226)等純化本質(zhì)粒表達的目的蛋白,也可以使用His-tag抗體(AH367)檢測和少量地分離純化目的蛋白。 pET-N-His-TEV質(zhì)粒的主要信息如下:
pET-N-His-TEV質(zhì)粒(5304bp)的圖譜如下:
pET-N-His-TEV的多克隆位點的詳細圖譜如下:
pET-N-His-TEV中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pET-N-His-TEV)包括:
pET-N-His-TEV中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pET-N-His-TEV once)包括:
pET-N-His-TEV質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下: T7 primer (4988-5004): 5′-TAATACGACTCACTATA-3′ pET-R primer (5218-5237): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′ pET-N-His-TEV的全序列信息:D2905 pET-N-His-TEV.txt。
上??道噬锟萍加邢薰?/span>
聯(lián)系商家時請?zhí)峒癱hemicalbook,有助于交易順利完成!
上??道噬?/p>