pARE-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
pARE-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)是信裕生物自行研發(fā)的用于檢測(cè)基于順式作用元件antioxidant response element(ARE，抗氧化響應(yīng)元件)的轉(zhuǎn)錄活性水平的報(bào)告基因質(zhì)粒。pARE-luc是以信裕生物的pGL6質(zhì)粒為模板，在其多克隆位點(diǎn)插入了2個(gè)ARE結(jié)合位點(diǎn)，可以高靈敏度地檢測(cè)順式作用元件ARE的激活水平，可以用于檢測(cè)細(xì)胞的抗氧化水平或氧化應(yīng)激狀態(tài)。
pGL6質(zhì)粒模板是用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行螢火蟲(chóng)螢光素酶(firefly luciferase)報(bào)告基因檢測(cè)的新一代質(zhì)粒。該報(bào)告基因質(zhì)粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改進(jìn)，一方面對(duì)于luciferase的編碼進(jìn)行了改進(jìn)，確保能更好地在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，同時(shí)整個(gè)質(zhì)粒中所有可以被預(yù)測(cè)出的可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)全部進(jìn)行了適當(dāng)?shù)耐蛔兲幚?，在保持原有功能不變的情況下，使各種轉(zhuǎn)錄因子在質(zhì)粒上的非特異性結(jié)合降到最低。
螢光素、螢光素酶、螢火蟲(chóng)螢光素酶和海腎螢光素酶也經(jīng)常被稱(chēng)作熒光素、熒光素酶、螢火蟲(chóng)熒光素酶和海腎熒光素酶。
pARE-luc質(zhì)粒的主要信息如下：
ARE response element(ARE RE)
32-77
luc2 reporter gene
123-1775
SV40 late poly(A)signal
1810-2031
SV40 early enhancer/promoter
2079-2497
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor)coding region
2522-3316
Synthetic poly(A)signal
3341-3389
Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region
3456-3475
ColE1-derived plasmid replication origin
3713
Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region
4504-5364
Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site
5469-5622
Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region
5571-5590
pARE-luc質(zhì)粒的圖譜如下：
pARE-luc的多克隆位點(diǎn)及ARE response element的詳細(xì)圖譜如下：
BglI KpnI NheI XhoI ARE response element
1
GGCCTAACTG
GCCGGTACCG
CTAGCCTCGA
CCGGATTGAC
CGGCCATGGC
GATCGGAGCT
51
AATCACTGAG
GGTGACTCAG
TCTGCAGAAG
CTTGGCAATC
TTAGTGACTC
CCACTGAGTC
AGACGTCTTC
GAACCGTTAG
pARE-luc中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pARE-luc)包括：
Aat II
Afl II
Asc I
Ase I
Bsa I
BsaA I
BsiW I
BspM II
BssH II
Eco72 I
EcoR I
EcoR V
Mlu I
Nde I
Nru I
PflM I
Pme I
Pml I
Psp1406 I
PspA I
Rsr II
Sac I
Sma I
SnaB I
Spl I
Srf I
Tth111 I
Vsp I
pARE-luc中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pARE-luc once)包括：
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
9
EcoN I
CCTNN`N,NNAGG
2997
Bgl I
GCCN,NNN`NGGC
9
BsiC I
TT`CG,AA
3392
Acc65 I
G`GTAC,C
15
BstB I
TT`CG,AA
3392
Asp718
G`GTAC,C
15
Sal I
G`TCGA,C
3406
Kpn I
G,GTAC`C
19
Afl III
A`CRYG,T
3656
Nhe I
G`CTAG,C
21
ApaL I
G`TGCA,C
3970
PaeR7 I
C`TCGA,G
27
HgiE II
ACCNNNNNNGGT -1/13
4235
Xho I
C`TCGA,G
27
Not I
GC`GGCC,GC
4476
Bgl II
A`GATC,T
79
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
4500
Hind III
A`AGCT,T
89
BstE II
G`GTNAC,C
4503
BsrG I
T`GTAC,A
614
Ahd I
GACNN,N`NNGTC
4578
Dra III
CAC,NNN`GTG
1270
Bsu36 I
CC`TNA,GG
4934
Gsu I
CTGGAG 21/19
1503
Pvu I
CG,AT`CG
4948
Bpm I
CTGGAG 22/20
1504
Sac II
CC,GC`GG
4972
Apo I
R`AATT,Y
1886
Bst1107 I
GTA|TAC
5088
Mun I
C`AATT,G
1950
Xca I
GTA|TAC
5088
BamH I
G`GATC,C
2043
Spe I
A`CTAG,T
5407
Stu I
AGG|CCT
2476
BsmB I
CGTCTC 7/11
5420
pARE-luc質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
RVprimer3(5571-5590):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pARE-luc的全序列信息：D2112 pARE-luc-seq.txt
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱(chēng)
包裝
KL-2112-1μg
pARE-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
1μg
KL-2112-100μg
pARE-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
100μg/span>
保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書(shū)面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明：
1. 首次使用1μg包裝的本產(chǎn)品時(shí)請(qǐng)先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，進(jìn)行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)?？梢酝ㄟ^(guò)酶切電泳進(jìn)行鑒定，或通過(guò)測(cè)序進(jìn)行鑒定。
2. 100μg包裝的本產(chǎn)品質(zhì)粒濃度為0.1μg/μl，共1ml?？梢灾苯佑糜诿盖谢蛘咿D(zhuǎn)染細(xì)胞。
3. pARE-luc可以用常規(guī)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染細(xì)胞。檢測(cè)時(shí)可以采用信裕生物的螢火蟲(chóng)螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(RG005RG006)或雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(RG027/RG028)。
關(guān)鍵字： pARE-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)說(shuō)明書(shū)；pARE-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)廠家
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專(zhuān)營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾?，并在北京、廣東，江西，吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。