pISRE-TA-luc (報告基因質粒)
pISRE-TA-luc (報告基因質粒)是信裕生物自行研發(fā)的用于檢測ISRE轉錄活性水平的報告基因質粒。pISRE-TA-luc是以信裕生物的pGL6-TA質粒為模板,在其多克隆位點插入了多個ISRE結合位點,可以高靈敏度地檢測ISRE的激活水平。
pGL6-TA質粒是用于在哺乳動物細胞中進行螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)報告基因檢測的新一代質粒。該報告基因質粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改進,一方面對于luciferase的編碼進行了改進,確保能更好地在哺乳動物細胞中進行表達,同時對整個質粒中所有可以被預測出的可能的轉錄因子結合位點全部進行了適當?shù)耐蛔兲幚?,在保持原有功能不變的情況下,使各種轉錄因子在質粒上的非特異性結合降到最低。
螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶也經常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶。
pISRE-TA-luc質粒的主要信息如下:
ISRE response element
26-85
Minimal TA promoter (pTA)
108-130
luc2 reporter gene
172-1824
SV40 late poly(A) signal
1859-2080
SV40 early enhancer/promoter
2128-2546
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region
2571-3365
Synthetic poly(A) signal
3390-3438
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region
3505-3524
ColE1-derived plasmid replication origin
3762
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region
4553-5413
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site
5518-5671
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region
5620-5639
pISRE-TA-luc質粒的圖譜如下:
pISRE-TA-luc的多克隆位點及ISRE response element的詳細圖譜如下:
BglI KpnI NheI ISRE response element
1
GGCCTAACTG
GCCGGTACCG
TGAAACTGAA
CCGGATTGAC
CGGCCATGGC
ACTTTGACTT
51
AAACTGAAAC
TGAAACTGAA
ACTGAAACTG
TGCAGAAGCT
TTTGACTTTG
ACTTTGACTT
TGACTTTGAC
ACGTCTTCGA
pISRE-TA-luc中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pISRE-TA-luc)包括:
Aat II
Afl II
Asc I
Ase I
Bsa I
BsaA I
BsiW I
BspM II
BssH II
Eco72 I
EcoR I
EcoR V
Mlu I
Nde I
Nru I
PaeR7 I
PflM I
Pme I
Pml I
Psp1406 I
PspA I
Rsr II
Sac I
Sma I
SnaB I
Spl I
Srf I
Tth111 I
Vsp I
Xcm I
Xho I
pISRE-TA-luc中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pISRE-TA-luc once)包括:
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
9
BstB I
TT`CG,AA
3441
Bgl I
GCCN,NNN`NGGC
9
Sal I
G`TCGA,C
3455
Acc65 I
G`GTAC,C
15
Afl III
A`CRYG,T
3705
Asp718
G`GTAC,C
15
ApaL I
G`TGCA,C
4019
Kpn I
G,GTAC`C
19
HgiE II
ACCNNNNNNGGT -1/13
4284
Nhe I
G`CTAG,C
21
Not I
GC`GGCC,GC
4525
Bgl II
A`GATC,T
87
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
4549
Hind III
A`AGCT,T
97
BstE II
G`GTNAC,C
4552
BsrG I
T`GTAC,A
663
Ahd I
GACNN,N`NNGTC
4627
Dra III
CAC,NNN`GTG
1319
Bsu36 I
CC`TNA,GG
4983
Gsu I
CTGGAG 21/19
1552
Pvu I
CG,AT`CG
4997
Bpm I
CTGGAG 22/20
1553
Sac II
CC,GC`GG
5021
Apo I
R`AATT,Y
1935
Bst1107 I
GTA|TAC
5137
Mun I
C`AATT,G
1999
Xca I
GTA|TAC
5137
BamH I
G`GATC,C
2092
Xca I
GTA|TAC
5137
Stu I
AGG|CCT
2525
Spe I
A`CTAG,T
5456
EcoN I
CCTNN`N,NNAGG
3046
BsmA I
GTCTC`/9
5468
BsiC I
TT`CG,AA
3441
BsmB I
CGTCTC 7/11
5469
pISRE-TA-luc質粒中推薦使用的測序引物序列如下:
RVprimer3 (5620-5639):
GCA AAA TAG GCT GTC CC
pISRE-TA-luc的全序列信息:D2179 pISRE-TA-luc-seq.txt
包裝清單:
KL-2179-1μg
pISRE-TA-luc (報告基因質粒)
1μg
KL-2179-100μg
pISRE-TA-luc (報告基因質粒)
100μg
保存條件:
-20℃保存。
注意事項:
本質粒未經信裕生物書面許可不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. 首次使用1μg包裝的本產品時,請先取少量本質粒轉化大腸桿菌,進行質粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質??梢酝ㄟ^酶切電泳進行鑒定,或通過測序進行鑒定。
2. 100μg包裝的本產品質粒濃度為0.1μg/μl,共1ml??梢灾苯佑糜诿盖谢蛘咿D染細胞。
3. pISRE-TA-luc可以用常規(guī)的細胞轉染方法轉染細胞。檢測時可采用信裕生物的螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒(RG005/RG006)或雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒(RG027/RG028)。
4. 可以激活ISRE的試劑,可以用作pISRE-TA-luc報告基因檢測時的陽性對照。
關鍵字: pISRE-TA-luc (報告基因質粒)說明書;pISRE-TA-luc (報告基因質粒)廠家
上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產、銷售、服務于一體的一家生物科技企業(yè),專營生化試劑、標準品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學,分子生物學等高生物產品??偛课挥谏虾?,并在北京、廣東,江西,吉林等全國30多個省市設有分公司和代理機構。涉及的產品被中國科學院、清華、北大、復旦,上海交大,復旦醫(yī)學院,上海中醫(yī)藥大學,華東師范大學,第二軍醫(yī)大學,曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質量和完善的售后服務確。