超快蛋白銀染試劑盒

產(chǎn)品及特點(diǎn)蛋白質(zhì)銀染的原理是銀離子(Ag+）可與蛋白質(zhì)等大分子有機(jī)物形成穩(wěn)定的復(fù)合物，然后用還原劑如甲醛在堿性環(huán)境下使 Ag+還原成銀顆粒，可把蛋白電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色，其靈敏度比考馬斯亮藍(lán)高 100 倍。但常規(guī)的銀染方法由固定、氧化、染色、顯影、終止等步驟組成，操作十分繁瑣，尤其不適用于大批量實(shí)驗(yàn)。為解決此問題，本公司推出本產(chǎn)品，其特點(diǎn)如下：

1. 超快，整個(gè)過程只需要不到 60 分鐘。

2. 操作簡單，只有固定（30 分鐘）、染色（10 分鐘）和顯影（10 分鐘）三步。

3. 靈敏度比考馬斯亮藍(lán)染色高 100 倍，能檢測到 10ng 的蛋白質(zhì)條帶。

4. 三個(gè)成分中的兩個(gè)都是現(xiàn)用現(xiàn)配，可重復(fù)性好。

5. 本規(guī)格可配制 1000mL 蛋白銀染溶液 A（染色液），實(shí)際使用次數(shù)根據(jù) PAGE膠大小不同而不同。
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 大紙盒包裝
蛋白銀染溶液 A 組分一（干粉） LM100810a1 2 g
蛋白銀染溶液 A 組分二，10× LM100810a2 100 mL
蛋白銀染溶液 A 組分三，10× LM100810a3 100 mL
蛋白銀染溶液 B 組分一，10× LM100810b1 100 mL
蛋白銀染溶液 B 組分二 LM100810b2 5 mL
使用手冊 100810sc 1 份

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。

自備試劑 去離子水，乙醇和乙酸。

使用方法 

一：配制銀染固定液 100 mL （對(duì) mini PAGE 膠）

1. 將自備的40mL 無水乙醇、10mL 乙酸和50 mL去離子水充分混合即可使用。本試劑盒不含這些成分。

二：配制溶液 A

2. 需要配制的蛋白銀染溶液 A（染色液）的體積完全跟 PAGE 膠的大小相關(guān)，一般的 mini-PAGE 膠需要 20-30mL。下面的用量是針對(duì)配制 100mL 蛋白銀染溶液 A。如果配制的蛋白銀染溶液 A 的體積不是 100mL，則需按比例改變各成分用量。在一干凈燒杯中加入下列成分?jǐn)嚢杌靹蚣纯?。蛋白銀染溶液 A 需要

新鮮配制。

成分 用量

自備的去離子水 80 mL

蛋白銀染溶液 A 成分一 0.2 g

蛋白銀染溶液 A 成分二 10 mL

蛋白銀染溶液 A 組分三 10 mL

三：配制蛋白銀染溶液 B

3. 需要配制的蛋白銀染溶液 B（顯色液）的體積完全跟 PAGE 膠的大小相關(guān)，一般的 mini-PAGE 膠需要 20-30mL。下面的用量是針對(duì)配制 100mL 蛋白銀染溶液 B。如果配制的蛋白銀染溶液 B 的體積不是 100mL，則需按比例改變各成分用量。在一干凈燒杯中加入下列成分?jǐn)嚢杌靹蚣纯伞５鞍足y染溶液 B 需要

新鮮配制。

成分 用量

自備的去離子水 89.5 mL

蛋白銀染溶液 B 成分一 10 mL

蛋白銀染溶液 B 組分二 0.5 mL

四：銀染

4. PAGE 電泳或 SDS-PAGE 電泳結(jié)束后，將膠轉(zhuǎn)移到裝有 100 mL 銀染固定液的瓷盤中，搖晃 30 分鐘以去除干擾銀染的成分（如甘氨酸、SDS、DTT、甘油等）。注：此步很重要，否則銀染背景很高。

5. 用 100 mL 自備的去離子水漂洗 2 次，每次 2 分鐘。

6. 將 PAGE 膠轉(zhuǎn)移到適當(dāng)體積的蛋白銀染溶液 A 中，使蛋白銀染溶液 A 在輕柔搖晃過程中能夠淹沒 PAGE 膠。室溫?fù)u晃處理 10 分鐘。

7. 倒掉蛋白銀染溶液 A，用 100 mL 自備的去離子水快速漂洗 2 次，每次半分鐘。

8. 將 PAGE 膠轉(zhuǎn)移到適當(dāng)體積的蛋白銀染溶液 B 中，使蛋白銀染溶液 B 在輕柔搖晃過程中能夠淹沒 PAGE 膠。室溫?fù)u晃直到蛋白電泳條帶顯現(xiàn)（一般需要

10 分鐘左右）。

9. 迅速將 PAGE 膠置于適當(dāng)背景下照相留存。膠的顏色肯能會(huì)逐漸加深，如果有必要保存膠，可以用自備的 5%的乙酸終止顯色。