瓊脂糖(REGULAR AGAROSE)是由瓊脂中分離出瓊脂果膠(agaropectin)的成分得來,瓊脂糖(REGULAR AGAROSE)不溶于冷水,易溶于沸水,緩溶于熱水。檢測(cè)凝膠強(qiáng)度為1.0%瓊脂糖(REGULAR AGAROSE)溶液在20攝氏度凝固后,能夠表面不破承受的壓強(qiáng)是1200g/cm2 在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖(REGULAR AGAROSE)用于DNA、脂蛋白和免疫電泳用;生化研究免疫擴(kuò)散等的承載物。當(dāng)實(shí)驗(yàn)中遇到瓊脂糖(REGULAR AGAROSE)不凝固時(shí),常規(guī)的檢測(cè)方法是檢查pH值,濃度,溫度,充分混勻等情況。
一,瓊脂糖(REGULAR AGAROSE)基本信息:
CAS#:9012-36-6
分子式 : C12H18O9
分子量 : 306.26
外觀:白色粉末
特性:膠強(qiáng)度(1.0%)(g/cm2):>1200
儲(chǔ)存條件:室溫干燥保存
別名:瓊脂糖凝膠
溶解性:不溶于冷水,易溶于沸水,緩溶于熱水;
二,生物實(shí)驗(yàn)中遇到樣品中加入瓊脂糖后,室溫不凝固的原因分析:
1、樣品PH值過低 ,偏酸,水解,瓊脂糖在PH值小于4則無法凝結(jié)。
2、所加瓊脂糖質(zhì)量不夠 ,增加用量。攪拌不均勻,倒板前沒有充分搖勻,凝固不均勻。
3、滅菌溫度過高,加熱時(shí)間過長(zhǎng)。PH改變或破壞了瓊脂糖的凝固度。
4、樣品沒有加熱溶解充分,就沒有凝固。
三,瓊脂粉、瓊脂糖、低熔點(diǎn)瓊脂糖在生物實(shí)驗(yàn)中的區(qū)別分類:
瓊脂粉是由瓊脂糖(agarose)和瓊脂果膠(agaropectin)組成的。瓊脂糖是線性的多聚物,基本結(jié)構(gòu)是1,3連結(jié)的β-D-半乳呋喃糖和1,4連結(jié)的3,6-脫水α-L-半乳呋喃糖。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質(zhì)混合物。它們的結(jié)構(gòu)相似,但帶硫酸根和羧基組分,凝膠能力差。簡(jiǎn)單地說,把瓊脂中的瓊脂果膠去掉,剩下的部分,就是瓊脂糖在工業(yè)上的瓊脂色澤由白到微黃,具有膠質(zhì)感,無氣味或有輕微的特征性氣味,瓊脂不溶于冷水,易溶于沸水,緩溶于熱水。
瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時(shí)形成良好的半固體狀的凝膠,這是它具有多種用途的主要特征和基礎(chǔ)。瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強(qiáng)度表示。強(qiáng)度越高,凝膠性能越好。質(zhì)量較好的瓊脂糖強(qiáng)度通常在1200克/cm2以上(1%膠濃度)。瓊脂糖的凝膠性是由存在的氫鍵所致,凡是能破壞氫鍵的因素都能導(dǎo)致凝膠性的破壞。瓊脂糖具有親水性,并幾乎完全不存在帶電基團(tuán),對(duì)敏感的生物大分子極少引起變性和吸附,是理想的惰性載體。在瓊脂糖制備過程中需要把瓊脂果膠盡量去除,否則瓊脂糖有可能存在極微量硫酸根和丙酮酸取代電離基團(tuán),就會(huì)造成電內(nèi)滲(EEO),電內(nèi)滲對(duì)質(zhì)點(diǎn)的移動(dòng)產(chǎn)生影響。質(zhì)量較好的瓊脂糖硫酸根含量比較低,通常在0.2%以下,電內(nèi)滲比較小,通常在0.13以下。
凝膠強(qiáng)度表示方法:
規(guī)格 凝膠強(qiáng)度(1.5%濃度溶液,20攝氏度,單獨(dú)克每平方厘米)
低強(qiáng)度 150-400
中強(qiáng)度 401-800
高強(qiáng)度 801-1200
超高強(qiáng)度 大于1200