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SYBR Green I,SYBR Green I
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SYBR Green I

價格 詢價
包裝 50μL
最小起訂量 50μL
發(fā)貨地 湖北
更新日期 2024-12-16
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產(chǎn)品詳情

中文名稱:SYBR Green I英文名稱:SYBR Green I
保存條件: -20℃避光保存純度規(guī)格: 99%
產(chǎn)品類別: 試劑
含量: 99%包裝: 50ul
外觀: 液體
2024-12-16 SYBR Green I SYBR Green I 50μL/RMB -20℃避光保存 99% 試劑

規(guī)格:50μL

保存:-20℃,避光保存。

 

SYBR Green I 是高靈敏的 DNA 熒光染料,適用于各種電泳分析,操作簡單,至少可檢出 20pg DNA,高于 EB 染色法 25-100 倍。SYBR Green I 與 dsDNA 結(jié)合熒光信號會增強 800-1000 倍,用SYBR Green I 染色的凝膠樣品熒光信號強,背景信號低,可適用于多種電泳分析。

SYBR Green I 適合于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠,聚丙烯酰胺凝膠電泳,脈沖電場凝膠電泳以及毛細管電泳等。

SYBR Green I 與雙鏈 DNA 的親和力非常高,因此可以用做電泳前染色,對分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq 酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4 連接酶等)沒有抑制作用。另外,SYBR Green I 與 EB相比,誘變能力大大降低。

 

使用方法:

注意:染料使用前應(yīng)在室溫下徹底融化混勻后使用。

SYBR Green I  后染方法 (推薦方法)

1. 制作不含染料的凝膠,按照常規(guī)方法進行電泳。

 

2. 用 pH 7.0 - 8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或 TE),按照 10000:1 的比例稀釋 SYBR GreenⅠ濃縮液(如 50ml 1×TAE 中加入 5μl 染料),混勻,制成染色溶液。

注:如要染色 RNA ,按照 5000 :1  比例稀釋。

 

3. 將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色 10-30 分鐘,染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個膠板,并染色 30 分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

 

4. 紫外燈下觀測。

SYBR Green I  預(yù)染方法

1. 6×SYBR loading buffer 預(yù)染液的配制:

10000×SYBR濃縮液

6μl

6μl

10×DNA loading buffer

0.6ml

-

6×DNA loading buffer

-

 

1×TE pH8.0

0.4ml

1.0ml

6×SYBR loading buffer預(yù)染液

1.0ml

1.0ml

 

6×SYBR loading buffer 預(yù)染液避光 2-8℃可以放置一個月以上。

 

2. 制膠:按常規(guī)方法制備凝膠,凝膠溫度降至 60℃左右時加入 10000×SYBR,使染料終濃度為 1×,如 40ml 凝膠溶液中加入 4μl 染料。

注:如要染色 RNA ,使染料終濃度為 2 ×(如 40ml  凝膠溶液中加入 8μl  染料)。

3. 樣品預(yù)染:取 1-2μl 6×SYBR loading buffer 預(yù)染液與電泳樣品和 Marker 混合,室溫預(yù)染3-5 分鐘。

4. 上樣、電泳后紫外燈下觀察。

 

使用注意事項

1.后染方法是推薦方法,能得到更好的電泳結(jié)果;由于 SYBR 對樣品過量非常敏感,預(yù)染方法容易出現(xiàn)條帶扭曲變形(建議泳道中每條帶的含量不要超過 5ng),請根據(jù)實際情況摸索出適合自己的實驗程序,

2. SRBR 對電泳緩沖液的 pH 要求嚴格,有效 pH 為 7.5-8.0,電泳時盡量使用新鮮配制的緩沖液,并保證合適的 pH 范圍。

3. SYBR Green 對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。

4. 使用酒精沉淀核酸中,SYBR Green I 可以全部從雙鏈核酸上去掉。

5. 如果想對用 SYBR Green I 染過的膠進行 Southern blot,建議在預(yù)雜交和雜交溶液中加入0.1%- 0.3% 的 SDS,可以有效去除 SYBR。

6. 在紫外下觀察,與雙鏈 DNA 接合的 SYBR Green I 呈現(xiàn)綠色熒光。如果膠中含有單鏈DNA 則顏色為橘黃。

 

 

 

 

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關(guān)鍵字: SYBR Green I

公司簡介

康迪斯化工(湖北)有限公司是一家立足于生命科學(xué)領(lǐng)域有自主知識產(chǎn)權(quán)的高新技術(shù)企業(yè),主要從事生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn),并以持續(xù)探索和開發(fā)生命科學(xué)技術(shù)為動力,致力于為科研工作者提供實用、高效的科研試劑,為生命科學(xué)的研究與發(fā)展提供有意義的幫助。
成立日期 2019-03-14 (6年) 注冊資本 200萬
員工人數(shù) 10-50人 年營業(yè)額 ¥ 1000萬-5000萬
主營行業(yè) 無機化工,中間體,生物化工,有機原料,化學(xué)試劑 經(jīng)營模式 貿(mào)易,工廠,試劑
  • 康迪斯化工(湖北)有限公司
VIP 6年
  • 公司成立:6年
  • 注冊資本:200萬
  • 企業(yè)類型:生產(chǎn)經(jīng)銷
  • 主營產(chǎn)品:異氰酸酯,聚硫橡膠,潤滑油
  • 公司地址:江岸經(jīng)濟開發(fā)區(qū)石橋科技產(chǎn)業(yè)園5棟
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