BMS-707035

價格	￥1378.57
包裝	1EA

最小起訂量	1EA
發(fā)貨地	其他
更新日期	2019-12-18

產品詳情

英文名稱:BMS-707035
規(guī)格: 5mg/10mM/1mL/10mg/50mg	貨號: S1366

Selleck Chemicals美國品牌，中國庫存現(xiàn)貨，Integrase抑制劑，CAS#729607-74-3。
更多詳情請訪問中國唯一官方網站： http://www.selleck.cn/products/BMS-707035.html

生物活性

產品描述	BMS-707035是一種特異性的HIV-I?integrase (IN)（整合酶）抑制劑，IC50為15 nM。Phase 2。
靶點	HIV 整合酶(IN)	?	?	?	?	?
IC50	15 nM?^[1]	?	?	?	?	?
體外研究	BMS-707035是與Raltegravir相似的嘧啶酰胺, 是個應用到臨床的整合酶抑制劑。BMS-707035 是有效的，特定 HIV的可逆抑制劑，抑制HIV整合酶鏈轉移活性，IC50為15 nM。然而, 一些整合酶突變型, 包括 V75I, Q148R, V151I, 和G163R 對HIV 整合酶抑制劑具有抗性。BMS-707035和靶點DNA與IN結合是互斥的，通過增加靶點 DNA量而克服BMS-707035對鏈轉移催化的抑制反應。BMS-707035 與IN的結合親和力也受預加工的 U5 長末端重復序列(LTR)處的四個末端堿基影響。IN的Gln¹⁴⁸?BMS-707035與 IN的結合的關鍵。^[1]另一方面，通過調節(jié)結合和分離的動力學，病毒LTR的3’末端阻礙 BMS-707035 與IN的結合率。^[2]
體內研究	?
臨床實驗	BMS-707035治療HIV-1感染已經完成二期臨床實驗階段。
特征	BMS-707035是有效的特定HIV整合酶(IN)可逆抑制劑。

推薦的實驗操作(此推薦來自于公開的文獻所以Selleck并不保證其有效性)

激酶實驗:?^[1]

鏈轉移活性和抑制實驗	通過親近閃爍檢測法(SPA)測量和多種雙重長末端重復序列絡合的純化整合酶活性。步，通過使個別寡核苷酸退火，而制備病毒雙重長末端重復序列。通過5’-生物素連接器在正鏈上使病毒（供體）LTR DNA 連到鏈霉親和素包被的SPA PVT 磁珠上。10 mg SPA PVT 磁珠懸浮在0.2 mL PBS上。懸浮液在低于5000×g轉速下離心15分鐘。移除懸浮液，小珠再次懸浮在 0.2 mL PBS, 0.85 M NaCl,和21 μL 12 μM 雙鏈 HIV LTR DNA混合液中。雙鏈序列為: 正鏈, 5’-生物素-ACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCA;負鏈, 5’-ACTGCTAGAGATTTTCCACACTGACTAAAAG。LTR DNA在室溫下進行搖擺配對，進行60分鐘，加入 0.8 mL TE，混合物在低于5000×g 轉速下離心，然后懸浮在0.8 mL TE, 50 mM NaCl混合物上。用TE, 和50 mM NaCl沖洗磁珠沖洗4次，進行離心除去未結合的病毒LTR DNA。最后磁珠再次懸浮在0.2 mL PBS中，在4^oC下儲存。 80鏈轉移反應的酶復合體準備如下: 0.15 mL 磁珠-DNA復合體, 2.25 mL SPA buffer (13.3 mM 二硫蘇糖醇, 32 mM MOPS, pH 7.0, 0.067% NP-40, 6.4% 聚乙二醇, 25.6 mM MgCl₂, 12.8% (v/v) Me₂SO, 和 100 mM NaCl), 和 IN (37 μg WT, 88 μg N155H, 和 36 μg Q148R)，在37^oC下溫育。1.5 小時后, 復合物顆粒化，然后再次懸浮在 2.4 mL SPA buffer中。通過滴定實驗測定IN適當用量，作為產生量鏈轉移產物而所需酶的最低用量。制備靶點DNA (5’-[³³P]TGACCAAGGGCTAATTCACT-3’，退火為5’-[³³P]AGTGAATTAGCCCTTGGTCA-3’) 。然后使?³³P-標記的寡核苷酸退火，形成靶點雙鏈DNA。鏈轉移實驗由 30 μL IN 復合物和10 μL 25% Me₂SO/H₂O)(v/v) 在白色微孔板上進行。在37^oC下溫育10分鐘后,加入 10 μL?³³P-標記的靶點DNA (1×10⁶?cpm) (靶點終濃度為0.92 nM)。板在 37^oC下維持2小時，然后加入 200 μL PBS, 50 mM EDTA使鏈轉移反應終止。使實驗板立起來過夜，然后在Topcount 閃爍計數(shù)器上讀數(shù)。通過SPA實驗測定HIV-1 IN 復合體抑制敏感性，在 10 μL 25% (v/v) Me₂SO/H₂O中加入溶于25% (v/v) Me₂SO/H₂O的BMS-707035的5倍連續(xù)稀釋液繪制S型劑量反應曲線，分析數(shù)據。

鏈轉移活性和抑制實驗

通過親近閃爍檢測法(SPA)測量和多種雙重長末端重復序列絡合的純化整合酶活性。步，通過使個別寡核苷酸退火，而制備病毒雙重長末端重復序列。通過5’-生物素連接器在正鏈上使病毒（供體）LTR DNA 連到鏈霉親和素包被的SPA PVT 磁珠上。10 mg SPA PVT 磁珠懸浮在0.2 mL PBS上。懸浮液在低于5000×g轉速下離心15分鐘。移除懸浮液，小珠再次懸浮在 0.2 mL PBS, 0.85 M NaCl,和21 μL 12 μM 雙鏈 HIV LTR DNA混合液中。雙鏈序列為: 正鏈, 5’-生物素-ACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCA;負鏈, 5’-ACTGCTAGAGATTTTCCACACTGACTAAAAG。LTR DNA在室溫下進行搖擺配對，進行60分鐘，加入 0.8 mL TE，混合物在低于5000×g 轉速下離心，然后懸浮在0.8 mL TE, 50 mM NaCl混合物上。用TE, 和50 mM NaCl沖洗磁珠沖洗4次，進行離心除去未結合的病毒LTR DNA。最后磁珠再次懸浮在0.2 mL PBS中，在4^oC下儲存。 80鏈轉移反應的酶復合體準備如下: 0.15 mL 磁珠-DNA復合體, 2.25 mL SPA buffer (13.3 mM 二硫蘇糖醇, 32 mM MOPS, pH 7.0, 0.067% NP-40, 6.4% 聚乙二醇, 25.6 mM MgCl₂, 12.8% (v/v) Me₂SO, 和 100 mM NaCl), 和 IN (37 μg WT, 88 μg N155H, 和 36 μg Q148R)，在37^oC下溫育。1.5 小時后, 復合物顆粒化，然后再次懸浮在 2.4 mL SPA buffer中。通過滴定實驗測定IN適當用量，作為產生量鏈轉移產物而所需酶的最低用量。制備靶點DNA (5’-[³³P]TGACCAAGGGCTAATTCACT-3’，退火為5’-[³³P]AGTGAATTAGCCCTTGGTCA-3’) 。然后使?³³P-標記的寡核苷酸退火，形成靶點雙鏈DNA。鏈轉移實驗由 30 μL IN 復合物和10 μL 25% Me₂SO/H₂O)(v/v) 在白色微孔板上進行。在37^oC下溫育10分鐘后,加入 10 μL?³³P-標記的靶點DNA (1×10⁶?cpm) (靶點終濃度為0.92 nM)。板在 37^oC下維持2小時，然后加入 200 μL PBS, 50 mM EDTA使鏈轉移反應終止。使實驗板立起來過夜，然后在Topcount 閃爍計數(shù)器上讀數(shù)。通過SPA實驗測定HIV-1 IN 復合體抑制敏感性，在 10 μL 25% (v/v) Me₂SO/H₂O中加入溶于25% (v/v) Me₂SO/H₂O的BMS-707035的5倍連續(xù)稀釋液繪制S型劑量反應曲線，分析數(shù)據。

溫馨提示：不可用于臨床治療。

關鍵字： BMS-707035;化學試劑

公司簡介

成立日期		注冊資本
員工人數(shù)		年營業(yè)額
主營行業(yè)		經營模式

Selleck中國

非會員

公司成立：暫無
注冊資本：暫無
企業(yè)類型：暫無
主營產品：暫無
公司地址：

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