??????DNase I,即Deoxyribonuclease I,中文名稱為脫氧核糖核酸酶I,是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA產(chǎn)生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸的核酸內(nèi)切酶。DNase I水解單鏈或雙鏈DNA后的產(chǎn)物,5'端為磷酸基團(tuán),3'端為羥基。 ??????DNase I活性依賴于鈣離子,并能被鎂離子或二價(jià)錳離子激活。鎂離子存在條件下,DNase I可隨機(jī)剪切雙鏈DNA的任意位點(diǎn);二價(jià)錳離子存在條件下,DNase I可在同一位點(diǎn)剪切DNA雙鏈,形成平末端,或1-2個(gè)核苷酸突出的粘末端。 ??????特點(diǎn):不含RNase(RNase?free),可以用于各種RNA樣品的處理。提供了用于DNase?I失活所需的EDTA。 ??????用途:制備不含DNA的RNA樣品;RT-PCR反應(yīng)前RNA樣品中去除基因組DNA等可能的DNA污染;體外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA轉(zhuǎn)錄后去除DNA模板; DNase I footprinting研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用;缺口平移(nick? translatioin);產(chǎn)生DNA隨機(jī)片段文庫(kù);細(xì)胞凋亡TUNEL檢測(cè)中部分剪切基因組DNA作為陽(yáng)性對(duì)照。 ??????來(lái)源:從牛胰腺純化得到。 ??????分子量:約32kDa(單體)。 ??????活性定義:37℃10分鐘內(nèi),將能夠完全降解1μg pBR322質(zhì)粒DNA所需的酶量定義為1個(gè)活性單位。 ??????活性檢測(cè)條件:40mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgSO4,1mM CaCl2,1μg of pBR322 DNA。 ??????純度:不含其它DNA內(nèi)切酶和外切酶,不含RNA酶。 ??????酶儲(chǔ)存溶液:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)glycerol。 ??????Reaction Buffer(10X):100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2。 ??????失活或抑制:加入EDTA至終濃度為2.5mM后,65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase?I失活。金屬離子螯合劑,達(dá)到毫摩爾/升濃度的鋅離子,0.1%的SDS,DTT、巰基乙醇等還原劑,50-100mM以上鹽濃度均對(duì)DNase I有顯著抑制作用。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存。 注意事項(xiàng):? ??????酶使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?
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