??????pRb-TA-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)是碧云天自行研發(fā)的用于檢測Rb(retinoblastoma protein)轉(zhuǎn)錄抑制活性水平的報(bào)告基因質(zhì)粒。pRb-TA-luc是以碧云天的pGL6-TA質(zhì)粒為模板,在其多克隆位點(diǎn)插入了多個(gè)Rb結(jié)合位點(diǎn),可以高靈敏度地檢測Rb的轉(zhuǎn)錄抑制活性水平。Rb可以和E2F等轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,抑制這些轉(zhuǎn)錄因子的激活,抑制細(xì)胞周期的進(jìn)展。Rb同時(shí)也可以作為一個(gè)抑制性轉(zhuǎn)錄因子直接結(jié)合到其響應(yīng)的順式作用元件,抑制該基因的轉(zhuǎn)錄。 ??????pGL6-TA質(zhì)粒是用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)報(bào)告基因檢測的新一代質(zhì)粒。該報(bào)告基因質(zhì)粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改進(jìn),一方面對于luciferase的編碼進(jìn)行了改進(jìn),確保能更好地在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá),同時(shí)對整個(gè)質(zhì)粒中所有可以被預(yù)測出的可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)全部進(jìn)行了適當(dāng)?shù)耐蛔兲幚?,在保持原有功能不變的情況下,使各種轉(zhuǎn)錄因子在質(zhì)粒上的非特異性結(jié)合降到最低。 ??????螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶。 ??????pRb-TA-luc質(zhì)粒的主要信息如下:
??????pRb-TA-luc質(zhì)粒的圖譜如下:
??????pRb-TA-luc的多克隆位點(diǎn)及Rb response element的詳細(xì)圖譜如下:
??????pRb-TA-luc中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pRb-TA-luc)包括:
??????pRb-TA-luc中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pRb-TA-luc once)包括:
??????pRb-TA-luc質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下: ??????RVprimer3(5626-5645): ??????CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC ??????pRb-TA-luc的全序列信息:d2248-pRb-TA-luc-seq.txt 包裝清單:
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