化學(xué)名

N-[2-(diethylamino)ethyl]-5-[(Z)-(5-fluoro-2-oxo-1H-indol-3-ylidene)methyl]-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3-carboxamide

簡稱

Sunitinib

別名

SU 011248, SU 11248, SU-011248, SU-11248, SU011248, SU11248, sunitinib malate, Sutent, 舒尼替尼

中文名

蘇尼替尼

化學(xué)式

C₂₂H₂₇FN₄O₂

分子量

398.47

CAS號

557795-19-4

純度

99.0%

溶劑/溶解度

Water <1mg/ml; DMSO 25mg/ml warmed; Ethanol <1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.25ml DMSO，或者每3.98mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC0240-10mM用DMSO配制。

產(chǎn)品描述

Sunitinib是一種多靶點(diǎn)RTK抑制劑，以VEGFR2(Flk-1)和PDGFRβ為靶點(diǎn)，IC50為80nM和2nM，對c-Kit也有抑制作用。

信號通路

Protein Tyrosine Kinase; Angiogenesis

靶點(diǎn)

PDGFRβ

VEGFR2

FGFR1

EGFR

－

IC50

2nM

80nM

2.9μM

>20μM

－

體外研究

Sunitinib能夠有效抑制Kit和FLT-3。Sunitinib是VEGFR2(Flk1)和PDGFRβ有效的ATP競爭性抑制劑，Ki分別為9nM和8nM，作用于VEGFR2和PDGFR比作用于FGFR-1、EGFR、Cdk2、Met、IGFR-1、Abl和src選擇性高10倍多。在血清饑餓的表達(dá)VEGFR2或PDGFRβ的NIH-3T3細(xì)胞中，Sunitinib抑制VEGF依賴性VEGFR2磷酸化和PDGF依賴性PDGFRβ磷酸化，IC50分別為10nM和10nM。對于過表達(dá)PDGFRβ或PDGFRα的NIH-3T3細(xì)胞，Sunitinib抑制VEGF對其誘導(dǎo)的增殖，IC50分別為39nM和69nM。Sunitinib抑制野生型FLT3、FLT3-ITD和FLT3-Asp835磷酸化，IC50分別為250nM、50nM和30nM。Sunitinib抑制MV4;11和OC1-AML5細(xì)胞的增殖，IC50分別為8nM和14nM，并以劑量依賴的方式誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

體內(nèi)研究

與實(shí)質(zhì)性，選擇性抑制VEGFR2或PDGFR在體內(nèi)磷酸化與信號傳導(dǎo)一致，Sunitinib(20-80mg/kg/day)對各種腫瘤異種移植模型，包括HT-29、A431、Colo205、H-460、SF763T、C6、A375或MDA-MB-435表現(xiàn)出廣泛有效的劑量依賴性抗腫瘤活性。Sunitinib以80mg/kg/day的劑量給藥21天，導(dǎo)致8只小鼠中6只完全的腫瘤消退，并且在治療結(jié)束后，110天的觀察期內(nèi)腫瘤不會(huì)再生。第二輪使用Sunitinib治療依然能夠有效抗腫瘤，但是不能完全恢復(fù)到輪治療的情況。Sunitinib治療導(dǎo)致腫瘤MVD顯著下降，在SF763T神經(jīng)膠質(zhì)瘤中減少~40%。SU11248治療導(dǎo)致表達(dá)熒光素酶的PC-3M異種移植物額外的腫瘤生長被完全抑制，盡管腫瘤大小沒有減少。在FLT3-ITD骨髓移植模型中，Sunitinib治療(20mg/kg/day)顯著抑制皮下MV4;11(FLT3-ITD)異種移植物的生長，并延長生存。

臨床實(shí)驗(yàn)

N/A

特征

N/A

酶活性檢測實(shí)驗(yàn)

方法

Sunitinib作用于VEGFR2(Flk-1)和PDGFRβ的IC50值使用包含PKT完整胞漿區(qū)的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶融合蛋白測定。生物化學(xué)的酪氨酸激酶試驗(yàn)，用來測定VEGFR2(Flk-1)和PDGFRβ反式磷酸化活性，在多肽底物poly-Glu,Tyr(4:1)預(yù)涂層(在PBS中20μg/well，4℃下培養(yǎng)過夜)的96微孔板中進(jìn)行。過量蛋白結(jié)合位點(diǎn)通過加入1-5%(w/v) BSA的PBS溶液阻斷。純化的GST融合蛋白在感染桿狀病毒的昆蟲細(xì)胞中產(chǎn)生。將GST-VEGFR2和GST-PDGFRβ加入微孔板的2倍濃度激酶稀釋緩沖液(由100mM HEPES、50mM NaCl、40μM NaVO4和0.02%(w/v) BSA組成)中。對GST-VEGFR2或GST-PDGFRβ的最終酶濃度為50ng/ml。隨后將25μl稀釋的Sunitinib加入每個(gè)反應(yīng)孔中以產(chǎn)生一系列適用于每個(gè)酶的抑制劑濃度。激酶反應(yīng)通過加入不同濃度的ATP MnCl2溶液起始，使ATP濃度跨越酶的Km值，終MnCl2濃度為10mM。板在室溫下培養(yǎng)5-15分鐘，然后加入EDTA停止反應(yīng)。將板用TBST洗滌3次。在TBST(包含0.5%(w/v) BSA、0.025%(w/v)脫脂奶粉和100μM NaVO4)中以1:10,000稀釋的兔子多克隆抗磷酸酪氨酸抗血清加入孔中，并在37℃下培養(yǎng)1小時(shí)。然后將板用TBST洗滌3次，接著加入山羊抗兔抗血清結(jié)合的辣根過氧化物酶(在TBST中以1:10,000稀釋)。板在37℃下培養(yǎng)1小時(shí)，然后用TBST清洗3次。加入2,2'-azino-di-[3-ethylbenzthiazoline sulfonate]作為底物后，測定每孔中的磷酸酪氨酸酶數(shù)量。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞系

RS4;11、MV4;11和OC1-AML5

濃度

溶解于DMSO，終濃度為~10μM

處理時(shí)間

24和48小時(shí)

方法

加入Sunitinib和FL(50ng/ml，僅FLT3-WT細(xì)胞)之前，細(xì)胞在包含0.1% FBS的培養(yǎng)基中饑餓過夜。培養(yǎng)48小時(shí)后，使用Alamar Blue法或臺(tái)盼藍(lán)細(xì)胞活性法測定增殖。加入Sunitinib 24小時(shí)后，通過蛋白免疫印跡法檢測多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的裂解或caspase-3水平，以測量細(xì)胞凋亡。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物模型

皮下植入HT-29、A431、Colo205、H-460、SF763T、C6、A375或MDA-MB-435的雌性nu/nu小鼠和負(fù)荷表達(dá)熒光素酶的PC-3M腫瘤的雄性nu/nu小鼠

配制

以羧甲基纖維素懸浮液或檸檬酸鹽緩沖溶液(pH3.5)形成

劑量

~80mg/kg

給藥方式

口服，每天一次

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

SC0240-10mM

Sunitinib (PDGFR抑制劑)

10mM×0.2ml

SC0240-5mg

Sunitinib (PDGFR抑制劑)

5mg

SC0240-25mg

Sunitinib (PDGFR抑制劑)

25mg

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說明書

1份