化學(xué)名

4-[(Z)-[4-oxo-2-sulfanylidene-3-[3-(trifluoromethyl)phenyl]-1,3-thiazolidin-5-ylidene]methyl]benzoic acid

簡(jiǎn)稱(chēng)

VX809

別名

VX-809, Lumacaftor, VX 809

中文名

N/A

化學(xué)式

C₂₄H₁₈F₂N₂O₅

分子量

452.41

CAS號(hào)

936727-05-8

純度

98%

溶劑/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO90mg/ml; Ethanol6mg/ml

溶液配制

5mg加入1.11ml DMSO，或者每4.52mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF9114-10mM用DMSO配制。

產(chǎn)品描述

VX-809 (Lumacaftor)通過(guò)促進(jìn)突變型CFTR(F508del-CFTR)的成熟，從而糾正囊性纖維癥中常見(jiàn)的CFTR突變，在fisher大鼠甲狀腺細(xì)胞中EC50為0.1μM。Phase 3。

信號(hào)通路

Transmembrane Transporters

靶點(diǎn)

F508del-CFTR

－

－

－

－

IC50

0.1μM(EC50)

－

－

－

－

體外研究

VX-809在雌激素受體(ER)水平上起作用的行為，使一部分F508del-CFTR采取正確折疊的方式，退出ER，轉(zhuǎn)移到細(xì)胞表面，正常起作用。VX-809作用于表達(dá) F508del-CFTR的Fischer大鼠甲狀腺(FRT)細(xì)胞，VX-809顯著提高F508del-CFTR突變，提高7.1倍，EC50為0.1μM，且增強(qiáng)F508del-CFTR調(diào)節(jié)的氯離子運(yùn)輸，提高5倍，EC50為0.5μM，而VRT-768作用時(shí)具有更高的EC50值，EC50分別為7.9μM和16μM。VX-809(3μM)作用于表達(dá)F508del-CFTR的HEK-293細(xì)胞，提高ER中的F508del-CFTR，提高6倍。VX-809作用于攜帶F508del-CFTR突變的原代人支氣管上皮(HBE)細(xì)胞，提高CFTR成熟度，且增強(qiáng)氯離子分泌，EC50分別為350nM和81nM，比Corr-4a和VRT-325更有效。VX-809修正的F508del-CFTR具有單通道開(kāi)發(fā)概率，為0.39，與正常CFTR類(lèi)似，正常CFTR為0.40。與VX-770不同，VX-809不是CFTR增強(qiáng)劑，急劇加入VX-809不會(huì)對(duì)F508del-CFTR功能造成影響。與VRT-325和Corr-4a相反，VX-809不會(huì)促進(jìn)正常或突變形式hERG或P-gp的進(jìn)程,及其他疾病引起錯(cuò)誤定位的蛋白質(zhì)，包括α1-抗胰蛋白酶Z突變(E342K-α1-AT)或N370S-β-葡萄糖苷酶，說(shuō)明VX-809特異性作用于CFTR。

體內(nèi)研究

N/A

臨床實(shí)驗(yàn)

N/A

特征

在糾正CFTR缺陷方面，VX-809比之前報(bào)道的藥物特異性更強(qiáng)，且更有效。

酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

方法

用濃度不斷增高的VX-809處理穩(wěn)定表達(dá)F508del-CFTR的Fischer大鼠甲狀腺(FRT)細(xì)胞48小時(shí)。溫育后，細(xì)胞收集在冰凍D-PBS溶液中(沒(méi)有鈣和鎂)，然后按1000×g轉(zhuǎn)速在4℃下離心。細(xì)胞顆粒溶解1% Nonidet P-40，0.5%去氧膽酸鈉，200mM NaCl，10mM Tris，pH 7.8，及1mM EDTA和蛋白酶抑制劑混合物中(1:250)，然后在冰上放置30分鐘。裂解物在10,000×g轉(zhuǎn)速4℃下旋轉(zhuǎn)10分鐘，將細(xì)胞核和不溶性物質(zhì)制成顆粒狀。12μg全部蛋白在Laemmli buffer中與5% β-巰基乙醇在37℃加熱5分鐘，然后上樣到3%到8% Tris-乙酸凝膠上。凝膠轉(zhuǎn)移到硝化纖維素中，使用單克隆CFTR抗體或GAPDH多克隆抗體進(jìn)行Western blotting。通過(guò)增強(qiáng)發(fā)光而進(jìn)行印跡。通過(guò)掃描片的NIH ImageJ分析而而測(cè)量C帶和GAPDH的相對(duì)量。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞系

FRT(CFTR或F508del-CFTR)，HEK-293(CFTT或F508del-CFTR)和HBE

濃度

溶于DMSO，終濃度為~0.1mM

處理時(shí)間

24或48小時(shí)

方法

使用濃度不斷增高的VX-809處理細(xì)胞24或48小時(shí)。使用Ussing chamber技術(shù)記錄CFTR介導(dǎo)氯離子運(yùn)輸中的跨膜電流(IT)結(jié)果。通過(guò)使用離體的內(nèi)面外向式膜片鉗測(cè)量CFTR單通道活性。使用單克隆CFTR抗體及免疫印跡技術(shù)測(cè)量表達(dá)CFTR或F508del-CFTR的FRT，HEK-293或HBE細(xì)胞中CFTR成熟度。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物模型

N/A

配制

N/A

劑量

N/A

給藥方式

N/A

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱(chēng)

包裝

SF9114-10mM

VX809 (CFTR調(diào)節(jié)劑)

10mM×0.2ml

SF9114-5mg

VX809 (CFTR調(diào)節(jié)劑)

5mg

SF9114-25mg

VX809 (CFTR調(diào)節(jié)劑)

25mg

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說(shuō)明書(shū)

1份