Pristimerin是一種醌三萜類化合物，通過(guò)抑制促存活的Akt/NF-κB/mTOR信號(hào)蛋白和抗凋亡的Bcl-2誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞凋亡

Pristimerin 在體外增強(qiáng)重組腺相關(guān)病毒載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因在人細(xì)胞系和小鼠肝細(xì)胞體內(nèi)的表達(dá)。

Pristimerin對(duì)缺氧介導(dǎo)的轉(zhuǎn)移的抑制作用涉及干細(xì)胞特性和PC-3前列腺癌細(xì)胞中的EMT。

本研究的目的是探討 Pristimerin是否影響缺氧前列腺癌 （PCa） PC-3 細(xì)胞的骨轉(zhuǎn)移、干細(xì)胞特性和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 （EMT）。
方法和結(jié)果：
PC-3 細(xì)胞在缺氧或常氧下培養(yǎng) 48 h，然后在常氧下用 0 至 0.8 μmol/l 濃度遞增的 Pristimerin 處理。Western blotting 檢測(cè)缺氧誘導(dǎo)因子-1α （HIF-1α）。用 CCK-8 測(cè)定評(píng)估增殖。Transwell 侵襲試驗(yàn)用于分析侵襲的效力。通過(guò)球形成、集落形成測(cè)定和 western blotting 檢測(cè)干細(xì)胞特征，包括 CD44 、 KLF4 、 OCT4 和 AGO2 ，它們是干細(xì)胞特征相關(guān)的標(biāo)志物。通過(guò) western blotting 評(píng)估 EMT 相關(guān)標(biāo)志物 N-cadherin 、 fibronectin 、 vimentin 和 ZEB1 的表達(dá)變化來(lái)證實(shí) EMT。向培養(yǎng)基中添加 Pristimerin以劑量依賴性方式降低缺氧誘導(dǎo)的 PC-3 細(xì)胞增殖。Pristimerin在體外有效抑制缺氧誘導(dǎo)的PCa細(xì)胞侵襲。此外，用 Pristimerin 處理細(xì)胞誘導(dǎo)了缺氧誘導(dǎo)的干細(xì)胞特性和 EMT 的逆轉(zhuǎn)，這通過(guò)球體形成、集落形成測(cè)定以及 CSC 和 EMT 相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)變化得到證實(shí)。低劑量 Pristimerin 對(duì) PCa 細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)的干細(xì)胞特征和 EMT 的逆轉(zhuǎn)是劑量依賴性的。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，Pristimerin治療可能是通過(guò)逆轉(zhuǎn)缺氧誘導(dǎo)的干細(xì)胞特征和癌細(xì)胞中EMT來(lái)抑制缺氧誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)移的潛在策略，這證明了Pristimerin作為PCa患者實(shí)用化學(xué)預(yù)防方法的可能性是合理的。

在本研究中，我們系統(tǒng)評(píng)價(jià)了兩種來(lái)自中藥的生物活性化合物 celastrol 和 Pristimerin，在體外人類細(xì)胞系和體內(nèi)小鼠肝細(xì)胞中增強(qiáng)重組腺相關(guān)病毒 （rAAV） 血清型載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因表達(dá)的能力。
方法和結(jié)果：
用模擬治療或 celastrol 或 Pristimerin 處理的 rAAV 載體感染人細(xì)胞系。治療后研究轉(zhuǎn)基因表達(dá)、核易位病毒基因組百分比和細(xì)胞內(nèi)蛋白泛素化。此外，非肥胖糖尿病/嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷型 γ （NSG） 小鼠徒勞地尾部注射 rAAV 載體，并與二甲基亞砜、 celastrol、Pristimerin 或陽(yáng)性對(duì)照硼替佐米共同給藥。檢測(cè)肝臟中的轉(zhuǎn)基因表達(dá)并隨著時(shí)間的推移進(jìn)行比較。我們觀察到，低至 1 μmol/L 濃度的 Pristimerin處理在體外顯著增強(qiáng)了 rAAV2 載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因表達(dá)，腹腔內(nèi)與 4 mg/（kg·d） Pristimerin共同給藥 3 d 顯著促進(jìn)了體內(nèi)小鼠肝細(xì)胞中的病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。Pristimerin 也顯著提高了酪氨酸突變型 rAAV2 載體以及攜帶超大轉(zhuǎn)基因盒的 rAAV8 載體的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。Pristimerin 介導(dǎo)觀察到的 rAAV 載體轉(zhuǎn)導(dǎo)效率增加的潛在分子機(jī)制包括抑制細(xì)胞內(nèi)蛋白的蛋白酶體降解和增強(qiáng)載體基因組的核轉(zhuǎn)位。
結(jié)論：
這些研究表明，Pristimerin和含有Pristimerin的草藥提取物在未來(lái)用rAAV載體進(jìn)行肝臟靶向基因治療中具有潛在的有益用途。

目前缺乏針對(duì)胰腺癌的有效治療方法，凸顯了對(duì)治療這種惡性腫瘤的安全有效藥物的迫切需求。在本研究中，我們?cè)u(píng)估了醌三萜類化合物 Pristimerin （PM） 對(duì) MiaPaCa-2 和 Panc-1 胰腺導(dǎo)管腺癌 （PDA） 細(xì)胞系的抗癌活性和作用機(jī)制。
方法和結(jié)果：
Pristimerin 處理抑制了兩種細(xì)胞系的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其特征是 Annexin V 結(jié)合增加，并裂解了 PARP-1 和 procaspases -3 、 -8 和 -9。Pristimerin 還誘導(dǎo)線粒體去極化和線粒體釋放細(xì)胞色素 c。Pristimerin 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡與抑制促存活 Akt 、 NF-κB 和 mTOR 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白及其下游中介如 Foxo-3α 和 cyclin D1 （Akt） 有關(guān);Cox-2 和 VEGF （NF-κB）;p-S6K1 和 p-4E-BP1 （mTOR） 以及 PKCε。Pristimerin 處理還抑制抗凋亡 Bcl-2 和存活素的表達(dá)，但不抑制 Bcl-xL 的表達(dá)。Pristimerin 對(duì) Bcl-2 的下調(diào)不是由于 Bcl-2 的蛋白酶體或溶酶體蛋白水解降解，因?yàn)樵诘鞍酌阁w抑制劑 MG132 或乳糖囊蛋白 （LAC） 或鈣蛋白酶抑制劑 MG101 存在下用 Pristimerin 處理未能阻斷 Pristimerin 對(duì) Bcl-2 的下調(diào)。另一方面，RT-PCR 分析顯示 Pristimerin 以劑量相關(guān)方式抑制 Bcl-2 mRNA，表明 Pristimerin 對(duì) Bcl-2 的抑制是通過(guò)抑制 Bcl-2 基因表達(dá)介導(dǎo)的。
結(jié)論：
因此，對(duì) Pristimerin抗腫瘤活性的機(jī)制理解可以促進(jìn) Pristimerin治療胰腺癌的體內(nèi)療效研究。