小檗堿誘導(dǎo) MG-63 人骨肉瘤細胞凋亡和 DNA 損傷。

小檗堿是一種從黃連根瘤的干燥根中提取的異喹啉生物堿，已被發(fā)現(xiàn)對一組已建立的癌細胞表現(xiàn)出顯著的抗癌作用。在治療的人骨肉瘤細胞系中，發(fā)現(xiàn) MG-63 細胞最敏感。 本研究調(diào)查了小檗堿對 MG-63 人骨肉瘤細胞的潛在遺傳毒性作用。
方法和結(jié)果：
使用 3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四唑溴化物測定法測定小檗堿對細胞活力的影響，并通過流式細胞術(shù)和 DNA 分子量標準測定分析細胞凋亡。γH2AX 病灶形成用于檢測 MG-63 細胞中的 DNA 損傷。通過 DNA 片段分析和流式細胞術(shù)確定，小檗堿以濃度和時間依賴性方式誘導(dǎo) MG-63 細胞凋亡的顯著增加。此外，與陰性對照相比，小檗堿誘導(dǎo)了 DNA 損傷的濃度和時間依賴性顯著增加。
結(jié)論：
總之，這些觀察結(jié)果表明小檗堿誘導(dǎo) MG-63 細胞凋亡和 DNA 損傷。

小檗堿通過抑制自發(fā)性高血壓大鼠頸動脈中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激來改善內(nèi)皮功能。

內(nèi)皮細胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng) （ER） 應(yīng)激的激活導(dǎo)致氧化應(yīng)激增加，并經(jīng)常導(dǎo)致細胞死亡，這與高血壓有關(guān)。 本研究調(diào)查了小檗堿（一種從黃連根瘤中純化的植物生物堿）對自發(fā)性高血壓大鼠 （SHR） 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響及其潛在機制。
方法和結(jié)果：
將來自正常血壓 WKYs 和 SHRs 的離體頸動脈懸浮在肌長圖中進行等長力測量。通過 Western blotting 測定蛋白質(zhì)磷酸化和表達。通過 DHE 染色測量活性氧 （ROS） 水平。與 WKY 動脈相比，SHR 頸動脈表現(xiàn)出乙酰膽堿觸發(fā)的內(nèi)皮依賴性收縮 （EDC） 和升高的 ROS 積累。此外，Western blot 分析顯示 SHR 頸動脈中 AMPK 磷酸化降低，eIF2α 磷酸化增加，ATF3 、 ATF6 、 XBP1 和 COX-2 水平升高，而這些病理改變通過與小檗堿孵育 12 小時逆轉(zhuǎn)。此外，AMPK 抑制劑化合物 C 或顯性陰性 AMPK 腺病毒抑制小檗堿對上述標志蛋白和 EDC 的影響。更重要的是，ROS 清除劑 tempol 和 tiron 加上 DETCA 或 ER 應(yīng)激抑制劑、4-PBA 和 TUCDA 使 ROS 和 COX-2 表達水平升高正?；p弱了 SHR 動脈中的 EDC。
結(jié)論：
綜上所述，目前的結(jié)果表明，小檗堿可能通過激活 AMPK 來減少 EDC，從而抑制 ER 應(yīng)激并隨后清除 ROS，導(dǎo)致 SHR 頸動脈中 COX-2 下調(diào)。因此，本研究為小檗堿對高血壓的血管有益作用提供了更多見解。

小檗堿是一種天然植物產(chǎn)品，可激活 AMP 活化蛋白激酶，在糖尿病和胰島素抵抗狀態(tài)下具有有益的代謝作用。

小檗堿已被證明具有抗糖尿病特性，盡管其作用方式尚不清楚。在這里，我們研究了小檗堿在兩種胰島素抵抗動物模型和胰島素反應(yīng)細胞系中的代謝影響。
方法和結(jié)果：
小檗堿減輕了體重，并在不改變 db/db 小鼠食物攝入量的情況下顯著改善了葡萄糖耐量。同樣，小檗堿降低了高脂肪喂養(yǎng)的 Wistar 大鼠的體重和血漿甘油三酯，并改善了胰島素作用。小檗堿下調(diào)參與脂肪生成的基因的表達，并上調(diào)參與脂肪組織和肌肉能量消耗的基因的表達。小檗堿處理導(dǎo)致 3T3-L1 脂肪細胞和 L6 肌管中的 AMP 活化蛋白激酶 （AMPK） 活性增加，以磷脂酰肌醇 3' 激酶非依賴性方式增加 L6 細胞中的 GLUT4 易位，并減少 3T3-L1 脂肪細胞中的脂質(zhì)積累。
結(jié)論：
這些發(fā)現(xiàn)表明，小檗堿至少部分通過刺激 AMPK 活性在治療糖尿病和肥胖方面顯示出有益作用。

小檗堿可改善阿爾茨海默病轉(zhuǎn)基因小鼠模型中的 β-淀粉樣蛋白病理、神經(jīng)膠質(zhì)增生和認知障礙。

淀粉樣蛋白前體蛋白 （APP） 異常加工衍生的 β-淀粉樣蛋白 （Aβ） 肽的積累是阿爾茨海默病 （AD） 大腦的常見病理標志。
方法和結(jié)果：
在本研究中，我們評價了從中草藥黃連中提取的小檗堿 （BBR） 對 TgCRND8 小鼠神經(jīng)病理學和認知障礙的治療效果，TgCRND8 小鼠是一種成熟的 AD 轉(zhuǎn)基因小鼠模型。兩個月齡的 TgCRND8 小鼠通過口服強飼法接受低劑量 （25 mg/kg /天） 或高劑量的 BBR （100 mg/kg /天） 直至 6 個月大。與載體對照治療相比，BBR 治療顯著改善了學習缺陷、長期空間記憶保留以及斑塊負荷。此外，酶聯(lián)免疫吸附測定 （ELISA） 測量顯示，BBR 處理小鼠的腦勻漿中洗滌劑可溶性和不溶性 β-淀粉樣蛋白水平顯著降低。糖原合成酶激酶 （GSK）3 是參與 APP 和 tau 磷酸化的主要激酶，BBR 處理顯著抑制。我們還發(fā)現(xiàn)，在穩(wěn)定表達人瑞典突變體 APP695 （N2a-SwedAPP） 的 N2a 小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞中，BBR 顯著降低了 APP 的 C 端片段水平以及通過 Akt/糖原合酶激酶 3 信號通路的 APP 和 tau 過度磷酸化。
結(jié)論：
我們的結(jié)果表明，BBR 通過調(diào)節(jié) APP 加工在 TgCRND8 小鼠中提供神經(jīng)保護作用，并且有必要進一步研究 BBR 用于治療 AD 的作用。

小檗堿逆轉(zhuǎn)人宮頸癌細胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化并抑制轉(zhuǎn)移和腫瘤誘導(dǎo)的血管生成。

小檗堿可改善大鼠單側(cè)輸尿管梗阻誘導(dǎo)的腎間質(zhì)纖維化。

探討小檗堿對單側(cè)輸尿管梗阻 （UUO） 大鼠模型中梗阻腎臟腎間質(zhì)纖維化 （RIF） 的潛在影響。
方法和結(jié)果：
將 48 只大鼠隨機分為 3 組： 假手術(shù)、載體處理的 UUO 和小檗堿處理的 UUO。用小檗堿 （200 mg/kg 每天） 或載體強飼大鼠。每組隨機選擇 8 只大鼠 kiped，并在 UUO 后第 14 天收集標本。評估生理參數(shù)和組織學變化，使用 Masson 三色和天狼星紅染色評估 RIF，測定氧化應(yīng)激和炎癥標志物，使用免疫組織化學或蛋白質(zhì)印跡分析測量轉(zhuǎn)化生長因子 β1 （TGF-β1） 、磷酸化 Smad3 （pSmad3） 和α平滑肌肌動蛋白 （α-SMA）。其余 UUO 大鼠在第 14 天通過經(jīng)皮腎造瘺術(shù)緩解了梗阻。在腎造瘺術(shù)前 14 天和緩解后第 7 天通過彩色多普勒血流成像進行左腎阻力指數(shù)測定。小檗堿處理顯著減弱了 UUO 誘導(dǎo)的 RIF。UUO 誘導(dǎo)的腎超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性降低增加，而升高的腎丙二醛水平顯著降低。小檗堿治療可顯著改善 UUO 誘導(dǎo)的炎癥，并降低 UUO 腎臟的 TGF-β1 、 pSmad3 和 α-SMA 表達。此外，與 UUO 組相比，小檗堿治療在 UUO 后第 14 天以及梗阻緩解后第 7 天顯著抑制了阻力指數(shù)的增加。
結(jié)論：
小檗堿治療通過抑制氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)和 TGF-β1/pSmad3 信號傳導(dǎo)改善 UUO 大鼠模型中的 RIF。

轉(zhuǎn)移是患者癌癥相關(guān)死亡的最常見原因，上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 （EMT） 對于癌癥轉(zhuǎn)移至關(guān)重要，癌癥轉(zhuǎn)移是一個多步驟的復(fù)雜過程，包括局部浸潤、內(nèi)滲、外滲和遠處部位的增殖。 當癌細胞轉(zhuǎn)移時，血管生成也是轉(zhuǎn)移播散所必需的，因為血管密度的增加將使腫瘤細胞更容易進入循環(huán)，并且代表了治療干預(yù)的合理目標。小檗堿具有多種抗炎和抗癌生物作用。
方法和結(jié)果：
在本研究中，我們提供了與小檗堿抗轉(zhuǎn)移作用相關(guān)的分子證據(jù)，顯示通過降低基質(zhì)金屬蛋白酶-2 和尿激酶型纖溶酶原激活劑的轉(zhuǎn)錄活性，幾乎完全抑制高度轉(zhuǎn)移性 SiHa 細胞的侵襲 （P < 0.001）。小檗堿逆轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化生長因子-β 1 誘導(dǎo)的 EMT，并導(dǎo)致上皮標志物（如 E-鈣粘蛋白）和抑制間充質(zhì)標志物（如 N-鈣粘蛋白和蝸牛-1）的上調(diào)。snail-1 特異性小干擾 RNA 對 snail-1 的選擇性抑制也顯示 SiHa 細胞中 E-cadherin 表達增加。小檗堿還減少了體外和體內(nèi)腫瘤誘導(dǎo)的血管生成。
結(jié)論：
重要的是，體內(nèi) BALB/c 裸鼠異種移植模型和尾靜脈注射模型顯示，小檗堿治療分別通過口服強飼法減少了腫瘤生長和肺轉(zhuǎn)移。綜上所述，這些發(fā)現(xiàn)表明小檗堿可以減少宮頸癌細胞的轉(zhuǎn)移和血管生成，從而構(gòu)成轉(zhuǎn)移控制的輔助治療。