RNA Pull-down試劑盒

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發(fā)貨地	上海
更新日期	2024-09-28

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產(chǎn)品詳情

中文名稱:RNA Pull-down試劑盒	英文名稱:RNA Pull-down Kit
品牌: Engibody	產(chǎn)地: 美國
產(chǎn)品類別: RNA和蛋白互作研究產(chǎn)品

品名：Smart-RNA-Pull? RNA Pull-down Kit，貨號：IF9608，品牌：Engibody

訂購及技術(shù)咨詢：朱小鷗，13817407320(微信同號)

NIH、麻省理工、哈佛、斯坦福等世界名校課題組青睞并長期采購的RNA Pull-down試劑盒！

RNA-結(jié)合蛋白體外Pull-down實驗試劑盒

Smart-RNA-Pull?
RNA Pull-down試劑盒的4大優(yōu)勢
1、本試劑盒適用于貼壁細胞、懸浮細胞、動物組織、植物組織及純化后的重組蛋白，適用于末端生物素標記的各種長度和復(fù)雜性的RNA探針。適用內(nèi)源性、過表達或體外翻譯的蛋白作為樣本類型。

2、本試劑盒使用生物素標記RNA探針直接捕獲目的蛋白。pull-down時不需要抗體，也不需要離心。完成RNA標記反應(yīng)后僅需極少的手動操作時間（小于3小時）。

3、本試劑盒適用于RBP與mRNA、RBP與LncRNA、RBP與miRNA、RBP與circRNA相互作用，下游銜接已知蛋白的Western blot驗證檢測和未知蛋白的質(zhì)譜鑒定。

4、本說明書是一本RNA Pull-down實驗的全面技術(shù)手冊，匯總了RNA與各種蛋白互作的詳細信息?？赐赀@本保姆級說明書，所有疑難都會迎刃而解，RNA Pull-down盡在掌握之中。

第一部分：背景簡介及應(yīng)用場景
RNA與蛋白質(zhì)相互作用分析
95%的人類基因組實際上并不編碼蛋白質(zhì)，而是產(chǎn)生大量非編碼RNA（ncRNA），這些RNA在生命的生長和發(fā)育中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，與艾滋病病毒/艾滋病、白血病、糖尿病等各種疾病密切相關(guān)，并參與干細胞發(fā)育和表觀遺傳學(xué)的調(diào)節(jié)。RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物驅(qū)動幾乎所有細胞過程中基因表達的轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)，包括剪接、核輸出、mRNA穩(wěn)定性和蛋白質(zhì)翻譯。因此，對轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和機制的理解取決于確定這些過程中RNA結(jié)合的變化。

RNA結(jié)合蛋白通過與單鏈RNA結(jié)合基序（RBM）結(jié)合來控制細胞生物學(xué)的許多方面。然而，RBM可以隱藏在其局部RNA結(jié)構(gòu)中，從而抑制RNA與蛋白質(zhì)的相互作用。

RNA與蛋白質(zhì)相互作用的研究越來越受到科學(xué)家的關(guān)注，成為表觀遺傳學(xué)研究的熱點。

目前RNA研究的國自然熱點主要是mRNA、LncRNA、miRNA、circRNA四大類。

磁珠法RNA-蛋白Pull-down捕獲試劑盒為研究人員提供了一種簡化、高效的方法，使用末端生物素標記的RNA作為誘餌來富集與RNA互作的蛋白。

適用于RBP與mRNA、RBP與LncRNA、RBP與miRNA、RBP與circRNA相互作用。

下游銜接已知蛋白的Western blot驗證檢測和未知蛋白的質(zhì)譜鑒定。

1、RNA Pull-down和RIP、RNA-EMSA、CLIP，這四種研究RNA-蛋白互作技術(shù)的內(nèi)在區(qū)別是什么？
1)、RNA Pull-down———In Vitro體外通過RNA探針捕獲目的蛋白或其他候選蛋白，獲取蛋白后進行WB檢測或MS質(zhì)譜鑒定。也是經(jīng)典方法。

2)、RNA-EMSA———RNA電泳凝膠遷移阻滯實驗(Electrophoretic Mobility Shift Assay)，In Vitro體外通過RNA探針檢測目的蛋白，反向驗證了RIP。是經(jīng)典方法。

3)、RIP———RNA蛋白免疫沉淀技術(shù)是一種用于在細胞天然背景下In Vivo體內(nèi)探測蛋白質(zhì)-RNA 相互作用的技術(shù)。這種方法可以用于檢測特定RBP蛋白與RNA的結(jié)合水平。

4)、CLIP———這是近年來的新興技術(shù)，紫外交聯(lián)RNA-RBP免疫沉淀技術(shù)，可以分為HITS-CLIP(CLIP-Seq)、PAR-CLIP、iCLIP、miCLIP。

2、RNA Pull-down和RIP的聯(lián)合分析，相互驗證
這是經(jīng)典研究策略，RIP是體內(nèi)In Vivo研究RNA和蛋白互作，RNA Pull-down是體外In Vitro捕獲與RNA互作的已知蛋白或未知蛋白，互相印證。

第二部分：技術(shù)原理和技術(shù)流程

技術(shù)原理：
當固定在鏈霉親和素磁珠上的RNA探針與蛋白樣本混合孵育時，樣本中可以與RNA探針結(jié)合的蛋白被探針捕獲，并與探針形成蛋白-探針復(fù)合物，經(jīng)過洗滌和洗脫得到目的蛋白，對于未知蛋白可以通過質(zhì)譜來鑒定，對于已知蛋白可以通過WB實驗來驗證。

第四部分：RNA Pull-down結(jié)果展示

最經(jīng)典的RNA和RBP互作的結(jié)果如下所示：

每個靶標蛋白的RNA探針均需要設(shè)計2個，例如RNA結(jié)合蛋白HuR可以和Androgen receptor 3′-UTR RNA結(jié)合，因此每組探針均包含2個，如下所示：

生物素標記野生型AR 3′-UTR RNA探針

5′-CUGGGCUUUUUUUUUCUCUUUCUCUCCUUUCUUUUUCUUCUUCCCUCCCUA-3′
250pmol (in 25μL)

多聚A陰性對照探針

poly(A)25 RNA, 250pmol (in 25μL)

RNA Pull-Down and WB assay of the HuR example

第五部分：RNA Pull-down試劑盒組分清單
（共計16個組分，均可單獨購買）

編號	組分名稱	數(shù)量	保存	注意
下列組分收到后需儲存在 4 °C中。
IF9304	核酸友好型Streptavidin Magnetic Beads 備注：此Streptavidin磁珠表面已預(yù)先包被核酸oligo，可以最大程度降低對探針的非特異性結(jié)合	1 mL	+4 °C	磁珠不要冷凍，不要干燥，不要高速離心
R-pull-002	1×RNA探針-磁珠結(jié)合反應(yīng)液	10 mL	+4 °C
R-pull-003	磁珠洗滌液	5 mL	+4 °C
R-pull-004	10×RNA探針-蛋白捕獲反應(yīng)液	1 mL	+4 °C
R-pull-005	R-pull專用1×洗滌液	10 mL	+4 °C
R-pull-006	R-pull專用洗脫液（變性）	1.5 mL	+4 °C
R-pull-007	R-pull專用洗脫液（非變性，A液）	4 mL	+4 °C
R-pull-008	R-pull專用洗脫液（非變性，B液）	0.5 mL	+4 °C
IF9217	快速靈敏蛋白染膠液（兼容質(zhì)譜）	50 mL	室溫
下列組分收到后必須要儲存在 -20 °C中
R-pull-010	DNase I套裝（含有10×Buffer）	100 U	-20 °C	用于細胞裂解物中DNA的去除
R-pull-011	RNase抑制劑	50 μL	-20 °C
R-pull-012	tRNA (10 mg/mL)	50 μL	-20 °C
R-pull-013	50% Glycerol	500 μL	-20 °C
R-pull-014	R-pull專用Loading Buffer（5×）	1 mL	-20 °C	用于SDS-PAGE
AT0098	山羊抗小鼠二抗 Conjugated HRP	100 μL	-20 °C	用于下游WB檢測
AT0097	山羊抗兔二抗 Conjugated HRP	100 μL	-20 °C	用于下游WB檢測

訂購及技術(shù)咨詢：朱小鷗，13817407320(微信同號)

關(guān)鍵字： RNA;RBP;RNA Binding Protein;RNA Pull-down Kit;HuR;

公司簡介

復(fù)名表觀遺傳學(xué)（上海復(fù)名醫(yī)療科技有限公司），專注于表觀遺傳學(xué)研究工具的開發(fā)和表觀技術(shù)服務(wù)的提供。經(jīng)過多年和全球著名大學(xué)表觀研究領(lǐng)域?qū)＜医淌诘慕涣骱吞接?，積累經(jīng)驗，精準解決表觀研究工具領(lǐng)域的痛點難點，在表觀基因組學(xué)、表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)和表觀蛋白組學(xué)領(lǐng)域均開發(fā)了一系列研究試劑盒并提供表觀技術(shù)服務(wù)，和哈佛大學(xué)，華盛頓大學(xué)，斯坦福大學(xué)，麻省理工學(xué)院，UCSC，UCSF，HHMI，德國海德堡大學(xué)，法國國家健康與醫(yī)學(xué)研究院inserm等世界名校均建立了密切的合作和交流，所開發(fā)的抗體，試劑，試劑盒受到了全球客戶的歡迎。 Engibody為復(fù)名表觀遺傳學(xué)旗下品牌，所開發(fā)的抗體，試劑，表觀試劑盒在全球范圍內(nèi)銷售，受到眾多世界著名大學(xué)課題組老師及醫(yī)藥500強巨頭的認可和喜愛。公司地址: 上海市嘉定區(qū)嘉定工業(yè)區(qū)永盛路1218號金元大廈908室。訂購請咨詢：13817407320(微信同號)

成立日期	2019-03-22 （6年）	注冊資本	200萬
員工人數(shù)	1-10人	年營業(yè)額	￥ 100萬-300萬
主營行業(yè)	抗體,癌癥研究,蛋白組學(xué),分子生物學(xué),細胞生物學(xué)	經(jīng)營模式	試劑,服務(wù)

上海復(fù)名醫(yī)療科技有限公司

非會員

公司成立：6年
注冊資本：200萬
企業(yè)類型：有限責(zé)任公司
主營產(chǎn)品：抗體，試劑盒
公司地址：上海市嘉定區(qū)嘉定工業(yè)區(qū)永盛路1218號金元大廈908室

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