研究六種香豆素(傘形素、蛇床子素、哥倫比亞丁、醋酸哥倫比亞內(nèi)丁、angelol-A 和 angelol-B,從當(dāng)歸根中分離得到的)在人 Caco-2 細(xì)胞單層模型中的吸收和跨上皮轉(zhuǎn)運(yùn)。方法和結(jié)果:采用體外培養(yǎng)的人結(jié)腸癌細(xì)胞系Caco-2細(xì)胞單層模型,研究6種香豆素從頂端(AP)到基底外側(cè)(BL)側(cè)以及從BL到AP側(cè)的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)。采用反相高效液相色譜法(HPLC)結(jié)合紫外吸收檢測器對(duì)6種香豆素進(jìn)行測定。計(jì)算了輸運(yùn)參數(shù)和表觀滲透系數(shù)(P(app)),并與普萘洛爾作為高滲透性對(duì)照物質(zhì)和阿替洛爾作為低滲透性對(duì)照物質(zhì)的輸運(yùn)參數(shù)和表觀滲透系數(shù)(P(app))進(jìn)行了比較。以碘乙酰胺為參考標(biāo)準(zhǔn)品,以抑制ATP依賴性轉(zhuǎn)運(yùn),以MK571作為MRP2的著名抑制劑,測定angelol-B的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。 6種香豆素的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)是被動(dòng)擴(kuò)散的主要過程。傘形酮、蛇子床子素、哥倫比亞內(nèi)丁、醋酸哥倫比亞內(nèi)丁、angelol-A和angelol-B從AP側(cè)到BL側(cè)的P(app)值分別為(2.679+/-0.263)×10(-5)、(1.306+/-0.324)×10(-5)、(0.595+/-0.086)×10(-6)、(2.930+/-0.410)×10(-6)、(1.532+/-0.444)×10(-5)和(1.413+/-0.243)×10(-5)cm/s,BL至AP側(cè)的P(app)值為(3.381+/-0.410)×10(-5), 分別為(0.898+/-0.134)×10(-5)、(0.510+/-0.183)×10(-6)、(0.222+/-0.025)×10(-6)、(1.203+/-0.280)×10(-5)和(0.754+/-0.092)×10(-5)厘米/秒。在該測定中,普萘洛爾的P(app)值為2.18 x 10(-5) cm/s,阿替洛爾的P(app)值為2.77 x 10(-7) cm/s。6種香豆素中,傘形素、蛇床子素、angelol-A和angelol-B從AP側(cè)到BL側(cè)的P(app)值與普萘洛爾相同,columbianadin和Columbianetin acetate位于普萘洛爾和阿替洛爾之間。當(dāng)用EBSS代替HBSS時(shí),實(shí)驗(yàn)中使用碘乙酰胺或MK-591,angelol-B的P(app)與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。傘形酮為(83.31+/-3.52)%,當(dāng)歸素為(77.39+/-7.38)%,蛇子素、科倫比阿丁和當(dāng)歸素-B為50%-65%,醋酸哥倫比亞內(nèi)汀低于10%。蛇床子素和columbianadin在Caco-2細(xì)胞中的積累率分別為(36.15+/-5.87)%和(53.90+/-4.39)%。結(jié)論:傘形酮、蛇床子素、columbianadin、Columbianetin acetate、angelol-A和angelol-B的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)是Caco-2細(xì)胞單層模型中的主要過程。據(jù)估計(jì),Umbelliferone、蛇床子素、angelol-A 和 angelol-B 是高度吸收的化合物,而 columbianadin 和 Columbianetin acetate 估計(jì)是中等吸收的化合物。在 Caco-2 細(xì)胞中,Osthol 和 columbianadin 似乎積累,醋酸 Columbianetin 可能被代謝。angelol-B的吸收和運(yùn)輸不受pH值變化和碘乙酰胺或MK571的存在的影響。
方法和結(jié)果:在本研究中,我們用各種溶劑提取了當(dāng)歸 (AP),以尋找具有鎮(zhèn)痛和抗炎作用的生物活性成分。結(jié)果表明:(1)甲醇、氯仿和乙酸乙酯提取物有效減輕了1%醋酸和熱板引起的疼痛。(2)甲醇、氯仿和乙酸乙酯提取物減少了3%福爾馬林或1.5%卡拉膠引起的水腫。(3)已從AP根中分離鑒定出16種化合物。在這些化合物中,columbianadin、Columbianetin acetate、bergapten、umbelliferone 和咖啡酸在 10 mg/kg 時(shí)顯著表現(xiàn)出抗炎和鎮(zhèn)痛活性。然而,只有蛇床子素和黃曲霉毒素顯示出抗炎活性。異歐前胡素僅顯示出鎮(zhèn)痛作用。結(jié)論:這些結(jié)果表明, AP 根部的抗炎鎮(zhèn)痛成分與炎癥物質(zhì)的外周抑制和對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響有關(guān)。
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王玲