采用響應(yīng)面法對靈芝提取條件進行優(yōu)化,基于Box-Behnken設(shè)計。方法和結(jié)果:二次模型充分模擬了靈芝酸 H 的響應(yīng),決定系數(shù) (R 2) 為 0.98。提取三萜類化合物的最佳工藝條件為100.00%乙醇,溫度為60.22°C,反應(yīng)時間為6.00 h,此時參比三萜類釓酸H的產(chǎn)量從0.88 mg/g提高到2.09 mg/g粉末。提取后,將富集三萜的餾分進一步分離為23個餾分,其中7個餾分為靈芝酸A、B、D、G、H和I以及靈芝烯酸D。在7種三萜類化合物中,靈芝烯酸D在Hep G2、Hela和Caco-2細胞中的細胞毒性最強,IC50值分別為0.14±0.01、0.18±0.02和0.26±0.03 mg/mL。而靈芝酸A、G和H相對無細胞毒性。結(jié)論:這些三萜類化合物的抑制作用變化可能與其化學(xué)結(jié)構(gòu)有關(guān)。
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王玲