腸出血性大腸桿菌 O157:H7 (EHEC) 感染是一個世界性問題,目前尚無有效的治療方法。生物膜的形成與腸出血性大腸桿菌感染密切相關(guān),也是抗菌素耐藥性的一種機制。方法與結(jié)果:對560種純化的EHEC植物化學(xué)物質(zhì)進行抗生素膜篩選,結(jié)果顯示,5μg/ml的銀杏酸C15:1和銀杏酸C17:1以及100μg/ml的銀杏葉提取物顯著抑制了聚苯乙烯和玻璃表面以及尼龍膜上的EHEC生物膜形成。重要的是,在它們的工作濃度下,銀杏酸和銀杏葉提取物不會影響細菌生長。轉(zhuǎn)錄分析表明,銀杏酸C15:1抑制腸大腸桿菌中的卷曲基因和噬菌體基因,這些發(fā)現(xiàn)與菌毛產(chǎn)生減少和生物膜減少一致。有趣的是,銀杏酸和銀杏葉提取物并沒有抑制共生大腸桿菌K-12菌株的生物膜形成。此外,銀杏酸和銀杏葉提取物抑制了3種金黃色葡萄球菌菌株的生物膜形成。結(jié)論:本研究結(jié)果表明,植物次生代謝產(chǎn)物是生物膜抑制劑的重要來源。
本研究以綠色熒光蛋白(GFP)標(biāo)記的菌株為研究對象,探討了銀杏酸C15:1(GA(C15:1))單體的抗菌活性及機制。方法和結(jié)果:GA對革蘭氏陽性菌具有顯著的抗菌活性,但一般不影響革蘭氏陰性菌的生長??咕鷻C制研究表明,大量的GA(C15:1)可以在短時間內(nèi)穿透GFP標(biāo)記的淀粉芽孢桿菌,從而導(dǎo)致細菌中GFP的淬滅。體外結(jié)果表明,GA(C15:1)可以抑制包括DNA聚合酶在內(nèi)的多種蛋白質(zhì)的活性。體內(nèi)結(jié)果表明,GA(C15:1)可顯著抑制DNA、RNA和淀粉樣芽孢桿菌蛋白的生物合成。結(jié)論:我們推測GA(C15:1)通過抑制淀粉雙歧桿菌的蛋白質(zhì)活性而達到其抗菌作用。GA(C15:1)不能大量穿透革蘭氏陰性菌,細菌細胞壁中的脂溶性成分可以截留GA(C15:1),這是GA(C15:1)對革蘭氏陰性菌沒有顯著抗菌作用的主要原因之一。
Pseudodactylogyrus 是水產(chǎn)養(yǎng)殖的歐洲鰻鰻的重要單基因寄生蟲,可引起嚴(yán)重的鰓病變。方法與結(jié)果:本研究采用生物測定引導(dǎo)的分離方法,研究了銀杏葉粗提取物、組分和胸膜外化合物在體內(nèi)條件下對假指趾病的影響。采用4種溶劑(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水)提取銀杏葉胸膜外。其中,只有石油醚提取物顯示出較強的活性,因此,使用各種色譜技術(shù)進行進一步的分離和純化。通過比較光譜數(shù)據(jù)(IR、NMR 和 EI-MS)與文獻值,鑒定出兩種具有有效活性的化合物,即銀杏酸 C13:0 和銀杏酸 C15:1。發(fā)現(xiàn)它們在 2.5mg l?1 和 6.0mg l?1 濃度下 100% 有效,ED?? 值分別為 0.72mg l?1 和 2.88mg l?1。在為期5天的安全性測試中,銀杏酸C13:0和銀杏酸C15:1分別在濃度高達10.0和18.0mg l?1時對健康幼鰻是安全的。結(jié)論:這兩種化合物具有潛在的結(jié)果,可以作為植物來源的抗寄生蟲藥來控制假指趾病。
上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化 (EMT) 是調(diào)節(jié)腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵細胞現(xiàn)象。方法與結(jié)果:本研究探討了銀杏酸是否會影響肺癌細胞中的EMT及其作用的相關(guān)潛在機制。我們發(fā)現(xiàn)銀杏酸 C15:1 (GA C15:1) 抑制 A549 和 H1299 肺癌細胞的細胞增殖、侵襲和遷移。GA C15:1 還抑制 EMT 相關(guān)基因(纖連蛋白、波形蛋白、N-鈣粘蛋白、MMP-9、MMP-2、Twist 和 Snail)的表達,并抑制 TGF-β 誘導(dǎo)的 EMT,通過降低間充質(zhì)標(biāo)志物(纖連蛋白、波形蛋白、N-鈣粘蛋白)、MMP-9、MMP-2、Twist 和 Snail 的表達來評估。然而,GA C15:1 不影響 A549 和 H1299 細胞中各種上皮標(biāo)志蛋白(Occludin 和 E-cadherin)的表達。TGF-β誘導(dǎo)的從上皮細胞到間充質(zhì)細胞的形態(tài)變化以及誘導(dǎo)的侵襲和遷移被GA C15:1逆轉(zhuǎn)。最后,GA C15:1不僅消除了基礎(chǔ)PI3K/Akt/mTOR信號級聯(lián)反應(yīng),還降低了TGF-β誘導(dǎo)的肺癌細胞PI3K/Akt/mTOR通路的磷酸化。結(jié)論:總體而言,這些發(fā)現(xiàn)表明GA C15:1通過抑制PI3K/Akt/mTOR信號通路抑制肺癌的侵襲和遷移,并為控制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移播散提供了潛在的治療化合物來源。
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王玲