本實(shí)驗(yàn)以銀杏籽為原料，用乙醇提取銀杏籽中的銀杏酸，用石油醚進(jìn)一步提取乙醇提取物。方法與結(jié)果：研究銀杏酸的純化過程，采用HPLC和LC-MS聯(lián)用法分析和檢測銀杏酸的組成和含量。以2種細(xì)菌和4種真菌為試驗(yàn)菌株，分別檢測銀杏酸的抗菌活性，并分別測定最低抑菌濃度（MIC）。結(jié)果表明，以石油醚、乙醚、甲醇為89：1：11體系，以1.2 mL/min的速度，硅膠柱層析純化效果更好。HPLC和LC-MS分析表明，銀杏籽中的銀杏酸主要由銀杏酸C13：0、C15：1、C17：2、C15：0、C17：1組成。脫脂銀杏粉中銀杏酸的含量按C13：0、C15：1、C17：1分別為0.11 g/kg，銀杏酸C13：0、C15：1、C17：1分別為0.013、0.042、0.055 g/kg。結(jié)論：銀杏酸對細(xì)菌大腸桿菌和枯草芽孢桿菌，以及真菌青霉菌、紫青霉菌、卡門培爾青霉菌和黑曲霉菌具有較廣的抗菌譜。銀杏酸對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和青霉菌的MIC分別為7.5、15、25 mg/mL。
Pseudodactylogyrus 是水產(chǎn)養(yǎng)殖的歐洲鰻鰻的重要單基因寄生蟲，可引起嚴(yán)重的鰓病變。 本研究采用生物測定引導(dǎo)的分離方法，研究了銀杏葉粗提取物、組分和胸膜外化合物在體內(nèi)條件下對假指趾病的影響。方法與結(jié)果：采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4種溶劑提取銀杏葉胸膜外。其中，只有石油醚提取物顯示出較強(qiáng)的活性，因此，使用各種色譜技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步的分離和純化。通過比較光譜數(shù)據(jù)（IR、NMR 和 EI-MS）與文獻(xiàn)值銀杏酸 C13：0 和 C15：1，鑒定出兩種顯示出有效活性的化合物。發(fā)現(xiàn)它們在 2.5 mg l- 1 和 6.0 mg l- 1 濃度下 100% 有效，ED50 值分別為 0.72 mg l- 1 和 2.88 mg l- 1。在為期5天的安全性測試中，銀杏酸C13：0和C15：1分別在濃度高達(dá)10.0和18.0 mg l-1時對健康幼鰻是安全的。結(jié)論：這兩種化合物具有潛在的結(jié)果，可以作為植物來源的抗寄生蟲藥來控制假指趾病。
研究了銀杏葉片的體外α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法和結(jié)果：黃葉和綠葉甲醇提取物的抑制活性分別為13.8 μg和40.1 μg mL（-1）。用正己烷、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行溶劑-溶劑萃取，將每種甲醇提取物分離成各自的餾分。正己烷組分（在綠葉和黃葉甲醇提取物中）表現(xiàn)出高α-葡萄糖苷酶抑制活性，IC50值分別為13.6和13.4 μg mL（-1）。通過硅膠柱層析進(jìn)一步分離正己烷餾分，得到最活躍的餾分，鑒定為銀杏酸C13：0和混合物（C13：0、C15：0、C15：1、C17：1和C17：2）。銀杏酸C13：0的α-葡萄糖苷酶抑制活性最高。結(jié)論：這是第一項(xiàng)成功分離銀杏酸作為α-葡萄糖苷酶抑制劑的研究。
銀杏葉葉和銀杏葉中的銀杏酸（GAs）代表了一種新型的軟體動物殺蟲劑。迄今為止，觀察到的軟體動物殺滅活性的機(jī)制在很大程度上仍然未知。由于銀杏酸C13：0（GA-C13：0）有效抑制了蝸牛的移動性，我們研究了該化合物與氯硝柳胺相比對線粒體功能和基因表達(dá)的影響。方法和結(jié)果：采用透射電子顯微鏡（TEM）檢測GAs誘導(dǎo)的蝸牛線粒體損傷，并使用實(shí)時熒光定量PCR對5種線粒體酶進(jìn)行基因表達(dá)譜分析。GA-C13：0 被發(fā)現(xiàn)對蝸牛線粒體有顯著影響，并伴有明顯的超微結(jié)構(gòu)變化。此外，GA-C13：0 還被發(fā)現(xiàn)抑制四種線粒體酶的基因表達(dá)，包括細(xì)胞色素 c 氧化酶、三磷酸腺苷 （ATP） 合酶、細(xì)胞色素 b 和二氫煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 （NADH） 脫氫酶。相比之下，氯硝柳胺對線粒體功能和基因表達(dá)沒有表現(xiàn)出這種影響，這表明GA-C13：0和氯硝柳胺的殺軟體動物活性不同。結(jié)論：我們的研究結(jié)果表明，蝸牛線粒體是銀杏酸殺軟體動物活性的潛在靶標(biāo)。
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王玲
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