Herba epimedii (HEP) 中的總黃酮類(lèi)化合物已被證明可以防止與雌激素缺乏相關(guān)的骨質(zhì)流失和骨質(zhì)退化,而不會(huì)產(chǎn)生任何子宮營(yíng)養(yǎng)作用。然而,目前尚不清楚HEP中的類(lèi)黃酮如何對(duì)骨骼發(fā)揮保護(hù)作用,以及不同的類(lèi)黃酮是否通過(guò)類(lèi)似的作用機(jī)制在骨細(xì)胞中發(fā)揮雌激素作用。方法與結(jié)果:本研究旨在探討從HEP中分離出的四種主要黃酮類(lèi)化合物(淫羊藿苷、苑苷-I、表美素B和唾液苷A)的骨合成代謝作用,以及介導(dǎo)它們?cè)诖笫蟪晒羌?xì)胞樣UMR-106細(xì)胞中的雌激素作用的機(jī)制。所有測(cè)試化合物均顯著刺激UMR-106細(xì)胞細(xì)胞增殖率、堿性磷酸鹽(ALP)活性和核因子κ-B配體(RANKL)受體激活劑mRNA的骨保護(hù)素(OPG)/受體激活劑的表達(dá),與10(-6)M ICI 182,780共孵育可消除其作用。沒(méi)有一種黃酮類(lèi)化合物表現(xiàn)出對(duì)ERα和ERβ的結(jié)合親和力。然而,Sagittatoside A 通過(guò) ERα 選擇性激活雌激素反應(yīng)元件 (ERE)-熒光素酶活性。此外,淫羊藿苷和唾液苷A誘導(dǎo)ERα在絲氨酸118殘基處磷酸化。結(jié)論:綜上所述,我們的結(jié)果表明,來(lái)自 HEP 的所有四種黃酮類(lèi)化合物都刺激了 UMR-106 細(xì)胞中的 ER 依賴(lài)性成骨細(xì)胞功能,但其中只有兩種似乎通過(guò)配體非依賴(lài)性激活 ERα 發(fā)揮其作用。我們的研究提供了證據(jù)來(lái)支持以下假設(shè),即類(lèi)黃酮對(duì)骨骼的雌激素樣保護(hù)作用是通過(guò)與雌激素的經(jīng)典作用不同的機(jī)制介導(dǎo)的。
方法與結(jié)果:采用CZE方法,同時(shí)測(cè)定不同種類(lèi)淫羊藿中15種黃酮,包括表美素B、表皮美素A、己烷苷F、表美素C、淫羊藿苷、矢米苷B、海矢苷A、己烷苷E、2''-O-鼠李糖基香葫蘆苷II.、包葫蘆苷VII、包芹苷I、曹芹苷C、表菊糖苷C、包芋苷II和山奈酚-3-O-鼠李糖苷,內(nèi)標(biāo)(IS)穩(wěn)定性對(duì)定量的影響也進(jìn)行了調(diào)查。因此,蘆丁由于在樣品溶液中的不穩(wěn)定特性而不能用作IS,這表明在分析時(shí)應(yīng)考慮IS在標(biāo)準(zhǔn)品和樣品溶液中的穩(wěn)定性。以穩(wěn)定的大豆苷元為IS,使用含有20%乙腈的50 mM硼砂緩沖液作為改性劑(pH 10.0),在分離電壓為25 kV,溫度為30°C時(shí),在35 min內(nèi)進(jìn)行分析。結(jié)論:該方法被驗(yàn)證為準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單、可重復(fù),并成功應(yīng)用于17種淫羊藿36個(gè)樣品的分析。
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王玲