方法與結(jié)果:本文采用熒光、圓二色性(CD)、紫外-可見(jiàn)光譜和分子對(duì)接方法研究了生理?xiàng)l件下人血清白蛋白(HSA)與Phillygenin的相互作用。Stern-Volmer分析表明,Phillygenin對(duì)HSA的熒光猝滅是由靜態(tài)機(jī)制引起的,在300、305和310K時(shí)結(jié)合常數(shù)分別為1.71×10(5)、1.61×10(5)和1.47×10(4)。紫外-可見(jiàn)光譜結(jié)果表明,在Phillygenin存在下,蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化。CD光譜顯示,Phillygenin改變了HSA構(gòu)象,α螺旋顯著減少,β折疊和無(wú)規(guī)螺旋結(jié)構(gòu)增加,表明部分蛋白質(zhì)去折疊。經(jīng)計(jì)算,供體(HSA)和受體(Phillygenin)之間的距離為3.52nm,同步熒光光譜結(jié)果表明,Phillygenin與HSA的結(jié)合可以誘導(dǎo)HSA的構(gòu)象變化。分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),Phillygenin在疏水口袋的IIIA結(jié)構(gòu)域與HSA結(jié)合,并具有氫鍵相互作用。離子鍵分別與Phillygenin的O(4)、O(5)和O(6)與ASN109、ARG186和LEU115的氮形成。氫鍵在 O (2) 和 SER419 之間形成。在銅(II)、鐵(III)和醇存在下,Phillygenin對(duì)HSA的表觀締合常數(shù)K(A)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)均在88.84-91.97%和16.09-18.85%范圍內(nèi)降低。結(jié)論:鑒于所提供的證據(jù),有望豐富我們對(duì) Phillygenin 與重要血漿蛋白 HSA 相互作用動(dòng)力學(xué)的認(rèn)識(shí),并有望為新啟發(fā)藥物的設(shè)計(jì)提供重要信息。
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王玲