中文名:RNase Inhibitor
英文名:RNase Inhibitor
純度:≥95%,1000U/μl,醫(yī)藥級(jí)
貨號(hào):R489312
包裝:1000ku、100ku
存儲(chǔ)溫度:-20°C儲(chǔ)存
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品說(shuō)明:
本制品是經(jīng)過(guò)大腸桿菌表達(dá)的重組蛋白,與RNase A形成 1:1 復(fù)合體,對(duì)RNase表現(xiàn)高度的非競(jìng)爭(zhēng)性抑制,本品屬蛋白質(zhì)性質(zhì),與其它競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑(核酸類(lèi)、無(wú)機(jī)磷酸類(lèi))不同,可以很容易地通過(guò)苯酚處理將其從反應(yīng)體系中除去。
活性單位定義:
抑制 5 ng RNase A 活性的 50% 所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位(U),RNase A 的活性通過(guò)水解Cyclic2′,3′-CMP 生成 3′-CMP 定量求得。
來(lái)源
由 E.coli 表達(dá),表達(dá)基因的來(lái)源為 human placenta 中編碼該酶的基因。
純度:
1) 300U的RNasin和1μg的λDNA-H ind III分解物在37℃下反應(yīng)1小時(shí),DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
2) 300U的RNasin和 1μg的Closed circμlar(RFI)pBR322 DNA 在37℃下反應(yīng)1小時(shí),DNA的電
泳譜帶不發(fā)生變化。
3) 100U的RNasin和 1μg的16S,23S rRNA在37℃下反應(yīng)1小時(shí),RNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
4) SDS-PAGE:在分子量64K Da處是單一帶。
應(yīng)用:
1) cDNA 合成反應(yīng);
2) 多核糖體的分離(Polysome isolation);
3) 體外翻譯(In vitro translation);
4) SP6 或 T7 RNA 聚合酶的體外轉(zhuǎn)錄;
5) 體外無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄(In vitro transcription w ith cell-free extract)。
使用注意:
1) 抑制活性的 pH 值范圍較廣,在 pH 7~8 時(shí)表現(xiàn)最大活性;
2) 起泡或強(qiáng)烈攪拌(Vortex 等)會(huì)引起失活;
3) 不抑制 RNase H 活性。
使用例:
cDNA 第一條鏈的合成。
1) 在微量離心管中配制下列反應(yīng)液,全量為20μ
請(qǐng)參考附件,插入圖片
2) 輕輕攪拌。
3) 室溫下10min放置后,移入42℃溫槽中。
4) 42℃保溫1小時(shí)。
5) 把樣品移入冰中冷卻2min。
遵循以下規(guī)范生產(chǎn)
1. ISO 9001:2015, certified facility。
2. 《GMP 附錄-細(xì)胞治療產(chǎn)品》國(guó)家藥品監(jiān)督管理局。
3. 《人用基因治療總論-中國(guó)藥典 2020》國(guó)家藥典委。
4. USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products 用于細(xì)胞治療,基因治療和組織工程產(chǎn)品中的輔料。
5. USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing 細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子。
6. Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products 用于生產(chǎn)細(xì)胞或基因治療藥物的生物來(lái)源原料。
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