描述：TIC10 ONC201 是一種有效的 TRAIL 誘導(dǎo)劑，也抑制 Akt 和 ERK 活性

相關(guān)類別：

靶點(diǎn)：

TRAIL

Akt

ERK

體外研究：TRAIL誘導(dǎo)化合物10（TIC10），一種有效的，口服活性且穩(wěn)定的小分子，其以p53非依賴性方式轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體（TRAIL）并穿過血腦屏障。 TIC10誘導(dǎo)腫瘤和正常細(xì)胞中TRAIL的持續(xù)上調(diào)，這可能有助于TIC10的可證明的抗腫瘤活性。 TIC10使激酶Akt和細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK）失活，導(dǎo)致Foxo3a易位到細(xì)胞核中，在那里它與TRAIL啟動(dòng)子結(jié)合，從而上調(diào)基因轉(zhuǎn)錄。 TIC10是一種有效的抗腫瘤治療劑，其作用于腫瘤細(xì)胞及其微環(huán)境，以增強(qiáng)內(nèi)源性腫瘤抑制因子TRAIL的濃度。 TIC10作為TRAIL誘導(dǎo)化合物。 TIC10引起TRAIL mRNA的劑量依賴性增加，并以p53非依賴性方式誘導(dǎo)幾種癌細(xì)胞系的細(xì)胞表面上的TRAIL蛋白定位。此外，pAkt和pERK均以劑量依賴性方式被TIC10處理下調(diào)。 TIC10還導(dǎo)致ERK總表達(dá)下調(diào)。

體內(nèi)研究：在DLD-1結(jié)腸癌異種移植物中，TIC10在治療后1周誘導(dǎo)腫瘤停滯，而TRAIL治療的腫瘤在單次劑量后進(jìn)展。單劑量的TIC10還誘導(dǎo)SW480異種移植物的持續(xù)消退，并且當(dāng)通過腹膜內(nèi)或口服途徑遞送時(shí)同樣有效，表明TIC10具有有利的口服生物利用度。在HCT116異種移植物模型中滴定單一口服劑量的TIC10顯示在25mg / kg下持續(xù)的抗腫瘤效力。在免疫活性小鼠中每周25mg / kg暴露于口服TIC10持續(xù)4周不會(huì)引起所選血清化學(xué)標(biāo)記物的任何變化。相同的口服給藥方案適用于Eμ-myc轉(zhuǎn)基因小鼠，其從第9周至第12周自發(fā)發(fā)展為靜息性淋巴瘤，并且TIC10顯著（P = 0.00789）延長這些小鼠的存活期4周。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：在Coulter-Beckman Elite Epics細(xì)胞計(jì)數(shù)器上分析漂浮和貼壁細(xì)胞。對(duì)于表面TRAIL實(shí)驗(yàn)，通過簡單的胰蛋白酶消化收獲貼壁細(xì)胞，在磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）中的4％多聚甲醛中固定20分鐘，與抗TRAIL抗體以1：250孵育過夜，洗滌并與抗兔孵育Alexa Fluor 488持續(xù)30分鐘，并進(jìn)行分析。在前向和側(cè)向散射上對(duì)細(xì)胞進(jìn)行門控以消除分析中的碎片和死細(xì)胞。除非另有說明，表面TRAIL數(shù)據(jù)表示為相對(duì)于對(duì)照樣品的中值熒光強(qiáng)度。使用來自Imgenex的抗體類似地分析表面DR5。對(duì)于亞G1期和細(xì)胞周期分析，將所有細(xì)胞沉淀并用乙醇固定，然后在RNase存在下用碘化丙錠染色。細(xì)胞活力測(cè)定在具有CellTiter-Glo的96孔黑壁透明底板中進(jìn)行。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：小鼠[1]對(duì)于皮下異種移植物，4至6周齡雌性無胸腺nu / nu小鼠接種每個(gè)后脅腹中指定細(xì)胞系的1×106個(gè)細(xì)胞（對(duì)于T98G為2.5×106）作為200-μL 1：1基質(zhì)膠（BD）/ PBS的懸浮液。在注射后允許所有皮下腫瘤建立1至4周，直至治療開始前達(dá)到約125mm 3的體積。所有腹膜內(nèi)和靜脈內(nèi)注射均以200μL的總體積給予。通過口服強(qiáng)飼法施用TIC10的口服制劑，并以含有20％Cremophor EL，10％DMSO和70％PBS的200μL懸浮液形式給予。在指定的時(shí)間點(diǎn)用數(shù)字卡尺監(jiān)測(cè)腫瘤。允許所有皮下腫瘤在注射后1-4周建立，直到在治療開始前達(dá)到~125mm 3的體積。在腫瘤消失后監(jiān)測(cè)腫瘤負(fù)荷的緩解3周，并在安樂死后通過目視檢查確認(rèn)。