1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 COLO 205
細(xì)胞別稱 Colo 205; CoLo 205; COLO-205; Colo-205; COLO.205; Colo205;COLO205; Co 205
細(xì)胞背景描述 COLO 205細(xì)胞是由T·U·Sample等人于1957年從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水分離而建系的,該病人在取腹水樣品前已用5-氟尿嘧啶治療4-6周;COLO 205細(xì)胞角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。
供體年齡 男;70歲
組織來(lái)源 結(jié)直腸腺癌,腹水轉(zhuǎn)移
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類(lèi)型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類(lèi)型 腸癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 半貼半懸
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞,懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞,可用離心管收集細(xì)胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細(xì)胞;
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸??;
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤(rùn)洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化,輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞;
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
傳代比例(密度) 5×10^5-1×10^6cells/mL
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~25-30 hours