1.細胞起源:
細胞簡稱 COLO 320DM
細胞別稱 COLO-320DM; COLO_320DM; COLO-320-DM; COLO320/DM;COLO320-DM; COLO320DM; Colo320DM; COLO320 DM; COLO 320DM
細胞背景描述 COLO 320DM細胞可產(chǎn)生5-羥色胺、去甲腎上腺素、腎上腺素、ACTH和甲狀旁腺素。COLO 320DM細胞角蛋白、波形蛋白弱陽性。
供體年齡 女;55歲
組織來源 器官:結(jié)腸;腫瘤分期:Dukes氏C型;疾病:結(jié)直腸腺癌
細胞形態(tài) 圓形
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 腸癌細胞
生長特性 半貼半懸
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細胞為半貼壁半懸浮細胞,懸浮細胞是活細胞,可用離心管收集細胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細胞;
2、部分貼壁不牢的細胞可直接吹起使之懸浮;
3、貼壁較牢固的細胞可用PBS潤洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進行終止消化,輕輕吹散細胞后離心搜集細胞;
4、將懸浮的細胞和貼壁的細胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
消化時間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 5×10^5-1×10^6cells/mL
換液頻次 2~3次/周