產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
M9333 | Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S （滅瘟素）（10 mg/ml） | 10mg | 668 |
M9337 | Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S （滅瘟素）（10 mg/ml） | 5×10mg | 2450 |
M9339 | Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S （滅瘟素）（10 mg/ml） | 10×10mg | 3873 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Blasticidin S是一種來(lái)自Streptomyces griseochromogenes的核苷類抗生素，通過(guò)干擾核糖體中肽鍵的形成來(lái)特異性地抑制原核和真核生物的蛋白質(zhì)合成。Blasticidin S用于篩選攜帶有bsr或BSD耐受基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。殺稻瘟菌素具有快速而強(qiáng)效的作用模式，很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。
貨號(hào)M9333，M9337，M9339均已均已液體形式提供，濃度為10 mg/ml（in HEPES緩沖液，pH 7.5）。
抗性基因
目前已經(jīng)克隆和測(cè)序的殺稻瘟菌素耐受基因有3種，一種是分離自產(chǎn)生菌Streptoverticillum sp.的乙?；D(zhuǎn)移酶基因bls，另外兩種是脫氨酶基因，包括從Bacillus cereus 中分離的bsr和從Aspergillus terreus 中分離的BSD 基因。Bsr和 BSD基因是最常用的篩選標(biāo)志，用于哺乳動(dòng)物和植物細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)，也可用于E.Coli。
產(chǎn)品性質(zhì)
分子式（Formula）：C17H26N8O5·HCl
Cas:3513-03-9
分子量（Molecular Weight）：458.9
外觀（Appearance）：白色凍干粉末
純度（Purity）：>95%（HPLC）
濃度：10 mg/ml in HEPES 緩沖液，pH 7.5
應(yīng)用參考濃度：
1)Escherichia coli
E. coli對(duì)Blasticidin S的敏感性稍差，但是轉(zhuǎn)化子對(duì)Blasticidin S具有耐受性，可以用低鹽LB培養(yǎng)基(pH 8)進(jìn)行篩選，濃度范圍為50-100 μg/ml Blasticidin S。高的pH值可以提高Blasticidin S的活性。
2)哺乳動(dòng)物細(xì)胞
哺乳動(dòng)物細(xì)胞中Blasticidin S的工作濃度范圍在1-50 μg/ml。初次實(shí)驗(yàn)建議通過(guò)滅殺曲線來(lái)確定佳使用濃度。
- 25-100 μg/ml in bacteria
- 1-30 μg/ml in mammalian cells
操作步驟(哺乳動(dòng)物穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選)
Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/ml。攜帶bsr或BSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，在含有Blasticidin S的正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基中孵育，用于篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。
(1)轉(zhuǎn)染后48h，用含有適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代(注：細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作好。細(xì)胞密度太高，抗生素效率降低。細(xì)胞分盤時(shí)覆蓋率不超過(guò)25%);
(2)每3-4天去除培養(yǎng)基，加入含抗生素的新鮮培養(yǎng)基;
(3)7天后檢測(cè)細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類和轉(zhuǎn)染/篩選效率，集落形成可能需要增加一周或更久。
(4)轉(zhuǎn)移5-10個(gè)耐受克隆到35mm細(xì)胞盤中，加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。
相關(guān)產(chǎn)品：
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 |
M0943 | 潮霉素B Hyaromycin B | 1g | 650 |
M0942 | 潮霉素B（50 mg/ml）Hygromycin B (50 mg/ml) | 1g | 680 |
M0336 | Phleomycin (20mg/ml) 腐草霉素（20 mg/ml） | 20mg | 921 |
M1113 | Zeocin博萊霉素（100 mg/ml） | 8×125mg | 2200 |
M2150 | Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素鹽酸鹽 | 25mg | 678 |
CB937 | Vancomycin Hydrochloride 鹽酸萬(wàn)古霉素 | 1g | 1868 |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃，避免反復(fù)凍融，有效期一年。
關(guān)鍵字： 3513-3-9，Blasticidin;
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