"MDA-MB-435:人乳腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升GAO，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HCC0070細胞類似產品：：NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞

Lu-65細胞類似產品：：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞

KYSE70細胞類似產品：：TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞

GC-2spd(ts)細胞類似產品：：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：乳腺癌

MDA-MB-435:人乳腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

SK MEL 5細胞類似產品：：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞

SCC25細胞類似產品：：Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞

CAKI.1細胞類似產品：：SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

HCC-2218細胞類似產品：：WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞

Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞類似產品：：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞

SKRC-52細胞類似產品：：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞

Me Wo細胞類似產品：：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞

SKOV3細胞類似產品：：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞

H-1793細胞類似產品：：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞

NCIH1793細胞類似產品：：D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞

Mouse podocyte細胞類似產品：：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞

IM95細胞類似產品：：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞

MN 60細胞類似產品：：NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞

FU-MMT-1細胞類似產品：：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞

MDA-435細胞類似產品：：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞

EBTr (NBL-4)細胞類似產品：：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞

QGY細胞類似產品：：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞

Potorous tridactylus Kidney 1細胞類似產品：：Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞

Jurkat clone A3細胞類似產品：：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞

L-M(TK-)細胞類似產品：：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞

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RL95-2細胞類似產品：：Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞

CAL 33細胞類似產品：：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞

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Swiss3T3細胞類似產品：：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞

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DF1細胞類似產品：：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞

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MFD-1細胞類似產品：：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞

HR1K細胞類似產品：：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞

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Turbot Embryonic Cell line細胞類似產品：：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞

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TN5B14細胞類似產品：：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞

L929細胞類似產品：：NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞

SK-ChA1細胞類似產品：：Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞

Nb 2細胞類似產品：：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞

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MDA-MB-157細胞類似產品：：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞

alphaTC1 Clone 6細胞類似產品：：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞

Anip[973]細胞類似產品：：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞

Sarcoma OSteogenic-2細胞類似產品：：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞

MDA-MB-435:人乳腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HEK293細胞類似產品：：U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞

KYSE70細胞類似產品：：TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞

MAD109細胞類似產品：：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞

LYR細胞類似產品：：SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞

MPP 89細胞類似產品：：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞

ECC 12細胞類似產品：：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞

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