"Evsa-T:人乳腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

U-373-MG細胞類似產(chǎn)品：：MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞

LADMAC細胞類似產(chǎn)品：：TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞

NCIH1770細胞類似產(chǎn)品：：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞

mousepodocyte細胞類似產(chǎn)品：：HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：乳腺癌；腹水轉(zhuǎn)移；女性

Evsa-T:人乳腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

CHL細胞類似產(chǎn)品：：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞

NPA 87細胞類似產(chǎn)品：：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞

SKES1細胞類似產(chǎn)品：：Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

Evsa-T:人乳腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

PSN1細胞類似產(chǎn)品：：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞

H-1734細胞類似產(chǎn)品：：JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞

H-647細胞類似產(chǎn)品：：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞

CAL 12細胞類似產(chǎn)品：：PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞

SW-1088細胞類似產(chǎn)品：：CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞

MCF7-CTRL細胞類似產(chǎn)品：：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞

ID8細胞類似產(chǎn)品：：IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞

KB細胞類似產(chǎn)品：：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞

GM03571細胞類似產(chǎn)品：：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞

NCI-H196細胞類似產(chǎn)品：：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞

H-1944細胞類似產(chǎn)品：：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞

TE-32細胞類似產(chǎn)品：：P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞

HEP-3B2細胞類似產(chǎn)品：：CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞

HTori3細胞類似產(chǎn)品：：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞

Mel-MeWo細胞類似產(chǎn)品：：UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞

MDA-MB-231細胞類似產(chǎn)品：：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞

MDA-MB-231細胞類似產(chǎn)品：：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞

Laboratory of Allergic Diseases 2細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞

Mv1Lu細胞類似產(chǎn)品：：P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞

KNS-62細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞

Pa16C細胞類似產(chǎn)品：：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞

NUGC4細胞類似產(chǎn)品：：HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞

MES-SA/Dx-5細胞類似產(chǎn)品：：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞

130 T細胞類似產(chǎn)品：：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞

Evsa-T:人乳腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NCI-H2122細胞類似產(chǎn)品：：R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞

HRA 19細胞類似產(chǎn)品：：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞

NCI.H522細胞類似產(chǎn)品：：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞

SKNBE細胞類似產(chǎn)品：：PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞

NH-6細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞

A-875細胞類似產(chǎn)品：：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞

Hs 683細胞類似產(chǎn)品：：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞類似產(chǎn)品：：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞

HCT 8細胞類似產(chǎn)品：：KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞

Opossum Kidney細胞類似產(chǎn)品：：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞

NCIH2172細胞類似產(chǎn)品：：MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞

C3H10T1/2CL8細胞類似產(chǎn)品：：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞

Mono Mac 1細胞類似產(chǎn)品：：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞

RASMCs細胞類似產(chǎn)品：：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞

H661細胞類似產(chǎn)品：：ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞

KFB細胞類似產(chǎn)品：：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞

74Int細胞類似產(chǎn)品：：RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞

OV-90細胞類似產(chǎn)品：：P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞

EBC-1/original細胞類似產(chǎn)品：：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞

PC-3/M細胞類似產(chǎn)品：：184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞

Ramos.G6.C10細胞類似產(chǎn)品：：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞

Ramos.G6.C10細胞類似產(chǎn)品：：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞

H-292細胞類似產(chǎn)品：：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞

UCLA-RO 81細胞類似產(chǎn)品：：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞

GM12878細胞類似產(chǎn)品：：KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞

HuH-6細胞類似產(chǎn)品：：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞

NCI-H1993細胞類似產(chǎn)品：：PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞

F-36P細胞類似產(chǎn)品：：Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞

M1細胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞

RSC 96細胞類似產(chǎn)品：：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞

Hce8693細胞類似產(chǎn)品：：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞

IOSE-Van細胞類似產(chǎn)品：：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞

KAT5細胞類似產(chǎn)品：：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞

MC3T3-E1(C4)細胞類似產(chǎn)品：：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞

MHCCLM3細胞類似產(chǎn)品：：HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞

MMQ細胞類似產(chǎn)品：：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、FET細胞、CemT4細胞

MDA415細胞類似產(chǎn)品：：H2135細胞、HEK-293-F細胞、SMA560細胞

H647細胞類似產(chǎn)品：：DMS-273細胞、HDQ-P1細胞、H-146細胞

751細胞類似產(chǎn)品：：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞

HCC-78細胞類似產(chǎn)品：：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞

MV-522細胞類似產(chǎn)品：：SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞

SK MEL-28細胞類似產(chǎn)品：：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞

A-253細胞類似產(chǎn)品：：RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞

U266B1細胞類似產(chǎn)品：：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞

253J-Bladder-V細胞類似產(chǎn)品：：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞

LO2細胞類似產(chǎn)品：：IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞

HuTu-80細胞類似產(chǎn)品：：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞

EnCa1細胞類似產(chǎn)品：：K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞

UM-UC14細胞類似產(chǎn)品：：NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞

H2052_MM細胞類似產(chǎn)品：：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞

L Wnt-3A細胞類似產(chǎn)品：：HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞

PLC/PRF/5細胞類似產(chǎn)品：：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞

KYSE-410細胞類似產(chǎn)品：：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞

A-498細胞類似產(chǎn)品：：Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞

HONE1細胞類似產(chǎn)品：：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞

CCD841CoN細胞類似產(chǎn)品：：Molm 14細胞、Hep2細胞、Hs742T細胞

CL1-5細胞類似產(chǎn)品：：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞

TN5B14細胞類似產(chǎn)品：：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞

S16細胞類似產(chǎn)品：：MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞

NCI H508細胞類似產(chǎn)品：：NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞

SVOG細胞類似產(chǎn)品：：Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞

58F細胞類似產(chǎn)品：：BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞

H2171細胞類似產(chǎn)品：：LS513細胞、293T/17細胞、HSC-4細胞

BT細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞

LNCaP-ATCC細胞類似產(chǎn)品：：MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞

Farage OL細胞類似產(chǎn)品：：F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞

GM3569細胞類似產(chǎn)品：：P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞

IA-LM細胞類似產(chǎn)品：：CCD-19Lu細胞、H2009細胞、H-220細胞

Walker 256細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞

HPASMC細胞類似產(chǎn)品：：SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞

HCC-1806細胞類似產(chǎn)品：：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞

HCC-1833細胞類似產(chǎn)品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞

HC11細胞類似產(chǎn)品：：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞

CAKI1細胞類似產(chǎn)品：：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞

PTK1細胞類似產(chǎn)品：：UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞

SR786細胞類似產(chǎn)品：：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞

HSC-I細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞

H-1944細胞類似產(chǎn)品：：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞

EAhy 926細胞類似產(chǎn)品：：SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞

H-865細胞類似產(chǎn)品：：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞

H2052_MM細胞類似產(chǎn)品：：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞

Ect1/E6E7細胞類似產(chǎn)品：：NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞

Evsa-T:人乳腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

786-0WT細胞類似產(chǎn)品：：PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞

DoHH-2細胞類似產(chǎn)品：：MSCs（mUCMSCs）細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞

JM-Jurkat細胞類似產(chǎn)品：：PFSK-1細胞、TE85細胞、Hs274T細胞

SW13細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞

P31-FUJ細胞類似產(chǎn)品：：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞

Hs281T細胞類似產(chǎn)品：：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞

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