"MB49細(xì)胞：小鼠膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：膀胱癌；雄性；C５７BL/Icrfa(t)
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會停止生長，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時(shí)，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長滿盤，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞
HPDEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO_320DM細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、U937細(xì)胞
QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞
NCTC 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDrTC細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞
IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
NCIH244細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIPF155C細(xì)胞、MF2059細(xì)胞、EJ細(xì)胞
MDA-kb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-699細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞
MXI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earles's cells細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞
SCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞
SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞
SU-DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-522細(xì)胞、SW 579細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞
HN 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
COV434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRS-82細(xì)胞、NWA細(xì)胞、FL83B細(xì)胞
THLE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7860細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞
Huh-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞
H647ell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞
HIEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo-1細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞
CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞
MLO-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELF細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞
L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞
OCI/AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、PC.3細(xì)胞
RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞
NCI-H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA-7細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞
HTori-3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7405細(xì)胞、TEC細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞
CNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE33細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
Scott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞、SW1116細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
WSUDLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HPF-1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞、LAN5細(xì)胞
COLO 678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-432細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞
WM115mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc203細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞
95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞
RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞
DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
Panc 02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞
LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
LAN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細(xì)胞、KMM1細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
NRK clone 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322T細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞、OE21細(xì)胞
SK-MEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV173細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞
CHO-Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2BBe細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞、H157細(xì)胞
CD18/HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞
CCD 841 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD4細(xì)胞、DF-1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞
OB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞、A2780細(xì)胞
HCC1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA420細(xì)胞、GM03569細(xì)胞、COV-434細(xì)胞
ARPE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、U 937細(xì)胞、IM 9細(xì)胞
BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2OS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞
P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SIRC細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞、H-2122細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞
C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞
Kit225/K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J111細(xì)胞、GM00215細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞
NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1sq細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞
EFM-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細(xì)胞、D-407細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細(xì)胞、T47D細(xì)胞、SNU869細(xì)胞
SCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
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