"A-427細胞:人肺腺癌細胞系
細胞背景資料:肺腺癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
OAW-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
IPAM-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
E.G7-OVA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
UWB1.289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
E.L.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
NCI-H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
SNGM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
BEP2D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞
DMS-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞
DMS-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
NCI-H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
UACC812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
A-172 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
HASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
IMR-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞
Hs 695.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
B-95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
HCC-2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞
SNU-761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
Colo-201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
MCF-10 Attached細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞
SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
NCI-H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
HCC9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
RCSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞
LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
SKO007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
PIG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
M-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
NGP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
EVSAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
UWB1289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
CLL-CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
COLO 394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRPEpiC細胞、TH1細胞、HLEB-3細胞
HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細胞、TE-15細胞、NIT-1細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細胞、RBL-I細胞、H1792細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1770細胞、AU-565細胞、U87MG細胞
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