"NCI-H1184細胞：人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好。
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非常考究你的功夫的！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
P388D1細胞系相關產(chǎn)品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
H1618細胞系相關產(chǎn)品：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
L-1210細胞系相關產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
OVTOKO細胞系相關產(chǎn)品：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
H4-II-E細胞系相關產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞
MDAMB436細胞系相關產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
LS-123細胞系相關產(chǎn)品：Hs 739.T細胞、HEK293-F細胞、H2330細胞
NK92-MI細胞系相關產(chǎn)品：MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞
HCC1438細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
PANC.1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
PASMCS細胞系相關產(chǎn)品：138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
MEL-526細胞系相關產(chǎn)品：Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
HBEpiC細胞系相關產(chǎn)品：RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
NCI.H226細胞系相關產(chǎn)品：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
NCI-H2405細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
IGROV 1細胞系相關產(chǎn)品：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
IGROV 1細胞系相關產(chǎn)品：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
KM12 SM細胞系相關產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
H-28細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關產(chǎn)品：SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
SK-MEL-5細胞系相關產(chǎn)品：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
Plaepi 34細胞系相關產(chǎn)品：MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞
578T細胞系相關產(chǎn)品：ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞
NKM1細胞系相關產(chǎn)品：ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
Mia PACA 2細胞系相關產(chǎn)品：U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
MM96L細胞系相關產(chǎn)品：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
MV(4;11)細胞系相關產(chǎn)品：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
32D.cl3細胞系相關產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞
Mia PACA 2細胞系相關產(chǎn)品：U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
ARH-77細胞系相關產(chǎn)品：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
PANC-03-27細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關產(chǎn)品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
H2023細胞系相關產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
Caov-3細胞系相關產(chǎn)品：BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞
SNU354細胞系相關產(chǎn)品：NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞
H3255細胞系相關產(chǎn)品：RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞
U-138MG細胞系相關產(chǎn)品：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
L-363細胞系相關產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
Hs 604.T細胞系相關產(chǎn)品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
RAW-264.7細胞系相關產(chǎn)品：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
T47-D細胞系相關產(chǎn)品：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
OCI-AML3細胞系相關產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
L615細胞系相關產(chǎn)品：GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
HARAB細胞系相關產(chǎn)品：EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關產(chǎn)品：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞
SKNDZ細胞系相關產(chǎn)品：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
293A細胞系相關產(chǎn)品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
OCIAML2細胞系相關產(chǎn)品：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關產(chǎn)品：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
HONE-1細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
WPE-int細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
LP-1細胞系相關產(chǎn)品：KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
PC 61細胞系相關產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞
McARH7777細胞系相關產(chǎn)品：NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
Rabbit Kidney 13細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1650細胞、A2780CP70細胞、SK-N-BE2C細胞
Rabbit Kidney 13細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1650細胞、A2780CP70細胞、SK-N-BE2C細胞
SW 403細胞系相關產(chǎn)品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
OVCAR8細胞系相關產(chǎn)品：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
SK-N-F1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
PCI-SG231細胞系相關產(chǎn)品：HT1376細胞、DU-145細胞、DF1細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
TE-3A細胞系相關產(chǎn)品：COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關產(chǎn)品：MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
32D/cl3細胞系相關產(chǎn)品：H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
NEC-8細胞系相關產(chǎn)品：TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞
NCIH378細胞系相關產(chǎn)品：COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞
SW948細胞系相關產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
SKNBE2細胞系相關產(chǎn)品：PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞
DLD1細胞系相關產(chǎn)品：AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
SK-OV-3細胞系相關產(chǎn)品：WM-239-A細胞、H1734細胞、NCI-H747細胞
NCIH841細胞系相關產(chǎn)品：C33-A細胞、C3H10T1-2細胞、AN3CA細胞
L02細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1651細胞、SW 48細胞、FK81細胞
OCI-Ly7細胞系相關產(chǎn)品：TN5B14細胞、P31-FUJ細胞、HCC-1428細胞
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