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上海賓穗生物科技有限公司

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NCI-H2195細胞:人肺癌細胞系
發(fā)布日期:2020/7/13 8:48:29發(fā)布人:上海賓穗生物科技有限公司

"NCI-H2195細胞:人肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞培養(yǎng)無菌操作的演示:凡是帶入超凈工作臺內的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌,繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處,使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈,動作要輕、準確,不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自來水刷洗,除去灰塵。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干:12小時后立即用自來水沖洗,再用洗滌劑刷洗,自來水沖干凈后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清潔液浸泡12小時,然后從酸缸內撈出器皿用自來水沖洗15次,最后蒸餾水沖洗3-5次和用雙蒸水過3次。烘干、包裝:洗干凈后先烘干,然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒:包裝好的器皿裝入高壓鍋內蓋好蓋子,打開開關和安全閥,當蒸氣成直線上升時,關閉安全閥,當指針指向15磅時,維持20-30分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中,泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清潔液(酸液),12小時后從酸缸內撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質干涸后粘附于玻璃上難以清洗),再用蒸餾水沖洗3次。烘干、包裝:洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內,培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
J-774細胞系相關產(chǎn)品:IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
CHL-11細胞系相關產(chǎn)品:U373 MG細胞、Chang Cells細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞
H676B細胞系相關產(chǎn)品:CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞
Anglne細胞系相關產(chǎn)品:COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
OVCAR 5細胞系相關產(chǎn)品:Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞
U 266細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
HR8348細胞系相關產(chǎn)品:DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
ME1細胞系相關產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
HL1細胞系相關產(chǎn)品:EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
RPMI8226/S細胞系相關產(chǎn)品:HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
MOLT 16細胞系相關產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
OUMS27細胞系相關產(chǎn)品:Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
MEG-01細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
OCI-Ly 19細胞系相關產(chǎn)品:SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
TR 146細胞系相關產(chǎn)品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
CAL51細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
CAL51細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
BRL3A細胞系相關產(chǎn)品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
EAhy 926細胞系相關產(chǎn)品:SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
SMA 560細胞系相關產(chǎn)品:HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關產(chǎn)品:CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞
CAL 51細胞系相關產(chǎn)品:Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
KY-270細胞系相關產(chǎn)品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
CAL78細胞系相關產(chǎn)品:MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關產(chǎn)品:MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞
HIT-T15細胞系相關產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
SUSM1細胞系相關產(chǎn)品:SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞
Karpas299細胞系相關產(chǎn)品:DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
AdHek細胞系相關產(chǎn)品:BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞
Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品:KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞
PC3-M細胞系相關產(chǎn)品:Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
QGY7701細胞系相關產(chǎn)品:U343細胞、CX1細胞、AM細胞
IOSE-80細胞系相關產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞
CAL 12T細胞系相關產(chǎn)品:HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
H-2591細胞系相關產(chǎn)品:HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
Hca-F細胞系相關產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞
YH-13細胞系相關產(chǎn)品:HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
U87MG細胞系相關產(chǎn)品:OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞
SNU-739細胞系相關產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
H-1792細胞系相關產(chǎn)品:Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞
Ca-Ski細胞系相關產(chǎn)品:LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
HEY-A8細胞系相關產(chǎn)品:H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞
Hs888Lu細胞系相關產(chǎn)品:COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞
TMK1細胞系相關產(chǎn)品:HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞
HCC1954-BL細胞系相關產(chǎn)品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
MDCK細胞系相關產(chǎn)品:SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞
MEL-526細胞系相關產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
UM-UC-1細胞系相關產(chǎn)品:FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞
SaOS細胞系相關產(chǎn)品:EA.Hy926細胞、RPMI #8226細胞、CWR22R-V1細胞
Hs832T細胞系相關產(chǎn)品:PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
MC3T3-E細胞系相關產(chǎn)品:SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
V79-4細胞系相關產(chǎn)品:LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
HCS-2/8細胞系相關產(chǎn)品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關產(chǎn)品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關產(chǎn)品:MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
NS-I/1細胞系相關產(chǎn)品:3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
BT-B細胞系相關產(chǎn)品:HET1A細胞、Eph4 1424細胞、G-292 clone A141B1細胞
SW-1990細胞系相關產(chǎn)品:H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
L-6 myoblast細胞系相關產(chǎn)品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
hTERT-HME-1細胞系相關產(chǎn)品:293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞
U937細胞系相關產(chǎn)品:Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
P3HR1細胞系相關產(chǎn)品:SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞
KMS18細胞系相關產(chǎn)品:NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
SUNE1細胞系相關產(chǎn)品:GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
NT2-D1細胞系相關產(chǎn)品:Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
SW 13細胞系相關產(chǎn)品:CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
H-510細胞系相關產(chǎn)品:LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關產(chǎn)品:SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
TE 85.T細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
T84細胞系相關產(chǎn)品:A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞
MG63細胞系相關產(chǎn)品:SW 1271細胞、C4-2 B細胞、WEHI-231細胞
HEK-293A細胞系相關產(chǎn)品:ECV-304細胞、HPDEC細胞、TK-1細胞
H-661細胞系相關產(chǎn)品:PCI-4M細胞、DSL6A/C1細胞、MFHL-2細胞
Vero E6細胞系相關產(chǎn)品:MV-4-11細胞、NCI-H522細胞、FHCRC subclone 11細胞
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