"NCI-H676B細胞：人肺腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系，公司摸索并積累了大量細胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數(shù)，為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究中最基礎(chǔ)、也是最常用的實驗手段。從凍存→復(fù)蘇→傳代→實驗，在每一次細胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護，小心培養(yǎng)，心里都是默默承諾：我要護你一世周全！可是可是……無數(shù)次細胞都因污染而離我而去，投入的不只是我們貌美如花的青春，還有那一去不復(fù)返的經(jīng)費！在細胞生物學(xué)，生物化學(xué)，免疫學(xué)，神經(jīng)生物學(xué)，病理學(xué)……只要涉及細胞的研究領(lǐng)域，都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中，也就屬支原體最狡猾了，他最善于隱藏自己，因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡，但會改變細胞的新陳代謝，甚至?xí)淖兗毎幕虮磉_譜，我們就這樣被欺騙了無數(shù)次，誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了?？墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗中總結(jié)出來，當你的細胞出現(xiàn)了這些癥狀時：生長速率改變；活性減弱；形態(tài)改變；染色體畸變；轉(zhuǎn)染效率顯著降低；細胞復(fù)蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了，也許你的細胞已經(jīng)被支原體欺凌了！
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞
ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
alpha TC1 clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
Panc327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
M-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞
HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
NEC-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
HFF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
FM-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞
V 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
NE-4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞
LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞
TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
KMS18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
D283-MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
NCI-SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
FOXNY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
K-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
PL-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
PLB 985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
T.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
LAPC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
Molm 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
NL20SV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞
NCIH526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
LLCPK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞
FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
LM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
LC-1/sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
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MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、KE-37細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-78細胞、rHSC-99細胞、HuH-28細胞
SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細胞、SNU-620細胞、THLE2細胞
GES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細胞、C-33-A細胞、Metastatic Variant 522細胞
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