"RPMI-1846細胞:人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
目前,跟公司簽訂長期戰(zhàn)略合作伙伴的科研單位有山西中醫(yī)學院、福建醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院、上海市第六人民醫(yī)院、北京大學醫(yī)學部、同濟大學、四平中心醫(yī)院、廣州中醫(yī)藥大學、中科院上海生命科學研究院生化與細胞研究所、解放軍第306醫(yī)院、江南大學、西南醫(yī)院、吉首大學、西南大學化學化工學院、寧波大學、福建醫(yī)科大學附屬醫(yī)院、蘇州市同濟醫(yī)院、中南大學、延安大學附屬醫(yī)院、中國科學院上海藥物研究所、天津市兒童醫(yī)院、江蘇省中醫(yī)藥研究院、湘雅醫(yī)學院、第四軍醫(yī)大學預防系勞動與環(huán)境教研室、揚州大學、上海交通大學、中國醫(yī)科大學、浙江省立同德醫(yī)院、中國人民解放軍第150中心醫(yī)院、蘇州大學、四川大學華西醫(yī)院、云南大學、揚州大學獸醫(yī)學院、上海交通大學醫(yī)學院附屬第九人民醫(yī)院、海南醫(yī)學院、江蘇腫瘤醫(yī)院、上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院、大連醫(yī)科大學附屬醫(yī)院、中國科學院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、沈陽藥科大學、廣州市第八人民醫(yī)院、南京大學、浙江中醫(yī)藥大學、蘭州大學、上海中醫(yī)藥大學、中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所、廈門市婦幼保健院、大學、南京軍區(qū)總醫(yī)院、天津市人民醫(yī)院、北京醫(yī)學科學腫瘤醫(yī)院、上海市同濟醫(yī)院、江蘇大學、桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院、中國科學院化學研究所
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結:懸浮性細胞應如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質,并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內應有多少細胞濃度?冷凍管內細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。
SCC-1395細胞系相關產(chǎn)品:mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
M-1細胞系相關產(chǎn)品:HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞
H2122細胞系相關產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞
NCI-BL1339細胞系相關產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關產(chǎn)品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞
M07e細胞系相關產(chǎn)品:BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞
RM1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
NG 108-15細胞系相關產(chǎn)品:GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
Det. 562細胞系相關產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
MDAMB361細胞系相關產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
FHCRC-11細胞系相關產(chǎn)品:Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
624-mel細胞系相關產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
BEP2D細胞系相關產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
H661細胞系相關產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
SU-DHL-10細胞系相關產(chǎn)品:BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞
U-87細胞系相關產(chǎn)品:LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
16HBE140細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
OCM-1細胞系相關產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
MDA-MB436細胞系相關產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
OVCAR8細胞系相關產(chǎn)品:RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
MDA-MB435細胞系相關產(chǎn)品:BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
JB6 Cl 30-7b細胞系相關產(chǎn)品:T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞
MPASMC細胞系相關產(chǎn)品:Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
CEM-0細胞系相關產(chǎn)品:33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞
Cor L88細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞
NCI-H460細胞系相關產(chǎn)品:SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
MUTZ-3細胞系相關產(chǎn)品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
MDA-MB 453細胞系相關產(chǎn)品:LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關產(chǎn)品:251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
NCI-HUT-596細胞系相關產(chǎn)品:675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞
HFL1細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
HTori:3細胞系相關產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
H2291細胞系相關產(chǎn)品:RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
MC116細胞系相關產(chǎn)品:Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
OVCA433細胞系相關產(chǎn)品:EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
CA922細胞系相關產(chǎn)品:MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
SU-DHL-1細胞系相關產(chǎn)品:DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
COLO-1細胞系相關產(chǎn)品:Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞
H-1385細胞系相關產(chǎn)品:WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
WTRL1細胞系相關產(chǎn)品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞
SU4細胞系相關產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
MIMVEC細胞系相關產(chǎn)品:A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞
M1細胞系相關產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
DMS273細胞系相關產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品:AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞
PTK-2細胞系相關產(chǎn)品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
Mono-Mac-1細胞系相關產(chǎn)品:ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
MHCC 97-H細胞系相關產(chǎn)品:NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
ARH-77細胞系相關產(chǎn)品:RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
CAL 120細胞系相關產(chǎn)品:CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
HCT-8/V細胞系相關產(chǎn)品:DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
MDA-MB-435細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
SW 1222細胞系相關產(chǎn)品:H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
H-526細胞系相關產(chǎn)品:HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
Pa17C細胞系相關產(chǎn)品:H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞
PCI-4B細胞系相關產(chǎn)品:GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關產(chǎn)品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
NCIH322細胞系相關產(chǎn)品:SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
SK-ES細胞系相關產(chǎn)品:LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞
PG-4 S+L-細胞系相關產(chǎn)品:PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
293EBNA細胞系相關產(chǎn)品:GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
JROECL 19細胞系相關產(chǎn)品:BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
BC3H-1細胞系相關產(chǎn)品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞
RAW2647細胞系相關產(chǎn)品:P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞
PIGI細胞系相關產(chǎn)品:GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞
KNS81細胞系相關產(chǎn)品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
M-G63細胞系相關產(chǎn)品:SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關產(chǎn)品:Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
GM03671細胞系相關產(chǎn)品:TE-3A細胞、BEND細胞、HS-445細胞
HOP-62細胞系相關產(chǎn)品:LK2細胞、SK MEL 28細胞、WM-266-4細胞
H211細胞系相關產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細胞、OCI-Ly1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
Hs-281-T細胞系相關產(chǎn)品:CL40細胞、SK MEL 5細胞、HCC-1588細胞
"