鄰氯苯亞甲基丙二腈 基本信息
中文名稱 | 鄰氯苯亞甲基丙二腈 |
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中文同義詞 | 鄰氯苯亞甲基丙二氰腈;鄰氯苯亞甲基丙二睛;鄰氯苯亞甲基丙二腈;檸檬酸合酶 來源于豬心臟;檸檬酸合酸;檸檬酸合酶;小鼠檸檬酸合成酶(CS)ELISA試劑盒;檸檬酸合酶(CITRATE SYNTHASE,CS)試劑盒 |
英文名稱 | CITRATE SYNTHASE |
英文同義詞 | EC 4.1.3.7;CITRATE CONDENSING ENZYME;CITRATE SYNTHASE;CITRATE OXALOACETATELYASE;CITRATE OXALOACETATE LYASE [COA-ACETYLATING;citrate synthase from chicken heart;citrate synthase from porcine heart;citrate synthase from thermoplasma*acidophilum |
CAS號 | 9027-96-7 |
分子式 | C6H5O7-3 |
分子量 | 189.0997 |
EINECS號 | 232-821-7 |
相關(guān)類別 | 聚糖;生物化學(xué)品;糖類;試劑盒-Elisa試劑盒;試劑盒-生化試劑盒;Lyases;Specialty Enzymes |
Mol文件 | 9027-96-7.mol |
結(jié)構(gòu)式 | ![]() |
鄰氯苯亞甲基丙二腈 性質(zhì)
儲存條件 | 2-8°C |
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溶解度 | 在水中的溶解度為1.0mg/mL,澄清 |
形態(tài) | 硫酸銨懸浮液 |
生物來源 | Porcine heart |
水溶解性 | H2O: soluble 1.0mg/mL, clear |
Specific Activity | ≥100units/mg protein |
化學(xué)性質(zhì)
本品是從動物的軟骨組織中得到的酸性黏多糖,為灰白色無定型粉末,略帶咸味;無臭;有引濕性;水溶液具黏稠性,加熱不凝結(jié)。在水中易溶,在乙醇、丙酮或冰醋酸中不溶。注射液為硫酸軟骨素鈉鹽的滅菌水溶液,為幾乎無色的澄明液體。
硫酸軟骨素按其化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)的差異,又分為A、B、C、D、E、F、H等多種,其中B、F、H分子中含L-艾杜糖醛酸。B不被玻璃酸酶降解,顯色反應(yīng)與A不同,B稱為硫酸皮膚素,在皮膚中較多。藥用硫酸軟骨素是從動物軟骨中提取的,主要是A、C及各種硫酸軟骨素的混合物。它具有澄清脂質(zhì)和提高機(jī)體解毒功能,還具有利尿和鎮(zhèn)痛等作用,對膠原性疾患有效,對由鏈霉素引起的聽覺障礙也有效。
用途
用于某些神經(jīng)性頭痛、神經(jīng)痛、關(guān)節(jié)痛、偏頭痛、動脈硬化癥等;也可用于鏈霉素引起的聽覺障礙及肝炎等的輔助治療。生產(chǎn)方法
方法一、稀堿-酶解提取法浸出 取20g/L(2%)NaOH溶液250kg,置浸泡缸內(nèi),加入潔白干燥軟骨40kg,在室外溫下每隔半小時(shí)緩緩攪拌1次,待浸出液相對密度達(dá)5°Be (20℃)時(shí)出料,用紗布過濾,骨渣再用適量蒸餾水浸泡20min,過濾,合并2次濾液,總體積為200L,得浸出液。
豬喉(鼻)軟骨[NaOh]→[室溫]浸出液
酶解 取浸出液置于消化罐中,攪拌下緩緩加入等體積鹽酸并調(diào)pH8.8-9,循環(huán)水浴上加熱,內(nèi)溫達(dá)到50℃時(shí)加入相當(dāng)于1:25倍胰酶1300g(宜用高倍胰酶),繼續(xù)升溫,控制消化溫度為53-54℃,共計(jì)7h。在水解過程中,由于氨基酸的增加,使pH下降,需用100g/L(10%)NaOH溶液調(diào)整pH8.8-9。水解終點(diǎn)檢查,取少許反應(yīng)液過濾于比色管中,10ml濾液滴加100 g/L(10%)三氯乙酸1-2滴,若微顯渾濁,說明消化良好,否則酌情增加胰酶。
浸出液[HCl, 胰酶]→[pH8.8-9, 53-54℃, 7h]酶解液
吸附 罐內(nèi)溫度保持在53-54℃,用1:1鹽酸調(diào)pH6.8-7,加入活性白陶土7kg,活性炭200g,攪拌,用100 g/L(10%) NaOH溶液調(diào)整pH6.8-7,攪拌吸附1h,再用1:2鹽酸調(diào)pH5.4,停止加熱,靜置片刻,過濾,得澄清濾液。
酶解液[活性白陶土,活性炭]→[pH6.8-7, 1h]濾液
沉淀、干燥 上述澄清濾液迅速用100 g/L(10%) NaOH溶液調(diào)整pH6,并加入澄清液體積10 g/L(1%)的氯化鈉,溶解,過濾至澄明。濾液在攪拌下緩緩加入90%乙醇,含醇達(dá)75%,每隔30min攪拌1次,約攪4-6次,使細(xì)小顆粒增大而沉降,靜置8h以上,吸去上清液,沉淀用無水乙醇充分脫水洗滌2次,抽干,于60-65℃干燥或真空干燥。
濾液[NaCl, 90%]→[pH6, 8h以上]沉淀物[無水乙醇]→[60-65℃]干品
制劑 按配方含硫酸軟骨素20 g/L(2%),氯化鈉8.5 g/L(0.85%),稱取標(biāo)示量107%的硫酸軟骨粉(以純品計(jì)),撒入注射用水中,使其膨脹,攪拌溶解,再加入氯化鈉,調(diào)pH5.5左右,加熱煮沸,用布氏漏斗趁熱過濾,濾液加入3-5 g/L(0.3%-0.5%)活性炭迅速加熱至微沸,保持15min,用砂棒包扎濾紙,趁藥液微沸時(shí)真空抽濾,濾液冷卻至室溫,補(bǔ)加注射用水至全量,用3號垂熔漏斗過濾至澄明,按每支2ml灌封,滅菌,即得硫酸軟骨素注射液。
干品[NaCl, 注射用水]→[pH5.5]硫酸軟骨素注射液
方法二、稀堿-濃鹽提取法
浸出、提取 將潔白干凈的碎軟骨置于提取罐內(nèi),加濃度為3-3.5mol/L的氯化鈉溶液(宜用高鹽濃度)使骨渣完全浸沒。用50%氫氧化鈉液調(diào)pHl2-13,攪拌提取10-15h,過濾,濾渣同上操作重提1次。提取過程中應(yīng)隨時(shí)校正pH12-13,合并2次提取液。
豬喉(鼻)軟骨[NaOH, NaCl]→[pH12-13, 10-15h]→提取液
鹽酸鹽解 提取液用2mol/L鹽酸調(diào)pH7-8,迅速升溫至80-90℃,保溫20min,冷卻后過濾,使濾液澄清,棄渣,得鹽解液。
提取液[HCl]→[pH7-8, 80-90℃]鹽解液
除酸性蛋白 將鹽解液調(diào)pH2-3,攪拌10min,靜置存放后再濾至澄清,調(diào)pH6.5,加2倍無離子水,使溶液的氯化鈉濃度為1mol/L左右。
鹽解液[水,NaCl]→[pH2-3, pH6.5]濾液
沉淀、干燥 上述溶液加入95%乙醇,使醇的體積分?jǐn)?shù)達(dá)到50%-60%(用乙醇表計(jì)量)存放至清,虹吸除上清液,沉淀抽干,脫水干燥,即得硫酸軟骨素成品。
濾液[乙醇]→硫酸軟骨素成品
方法三、酶解—樹脂提取法
將鯨魚軟骨絞碎,加入1mol/L氫氧化鈉溶液浸泡,40℃保溫水解2h或加pH7.5的水浸泡,用蛋白酶55℃保溫水解20h,再加鹽酸中和近中性,過濾,調(diào)整濾液中氯化鈉濃度達(dá)到0.5mol/L。然后,將溶液通過Amberlite IRA-933型離子交換樹脂柱,吸附完畢,用0.5 mol/L氯化鈉溶液洗滌,再用1.8 mol/L氯化鈉溶液洗脫,流速2L/h,洗脫液脫鹽,乙醇沉淀,離心,收集沉淀,真空干燥,即得成品。
鯨魚軟骨漿[1mol/L NaOH, 蛋白酶,HCl]→[40℃, 2h; 55℃, 20h; pH7]濾液[0.5 mol/L NaCl, IRA-933樹脂柱]→洗脫液[乙醇]成品
應(yīng)用此工藝制得的硫酸軟骨素樣品,經(jīng)紙電泳檢查為單一區(qū)帶,抗原物質(zhì)試驗(yàn)結(jié)果為陰性,含硫量為7.2%。其優(yōu)點(diǎn)是酶水解或稀堿水解與樹脂交換技術(shù)相結(jié)合,保證了硫酸軟骨素分子不降解,解決了成品純度問題。方法簡便,收率高,是一種較有實(shí)用價(jià)值的制備方法。
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